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摘要：目的 对本地区粘液型和非粘液型铜绿假单胞菌临床分离特点和耐药性进行动态分析，从而为临床初始治疗性抗生素的使用提依据。方法 选择在2018年1月至2019年10月期间就诊于本院取呼吸道标本培养的病例，共分离出铜绿假单胞菌530株，回顾性分析它们的耐药性和科室来源构成比。结果 病原体为粘液型铜绿假单胞菌的流行病学因素为慢性阻塞肺病、结构性肺病普遍较敏，而来自一般住院和重症医学科对药物敏感性逐渐严重。结论 粘液型和非粘液型铜绿假单胞菌的临床特点和耐药性存在显著差异，医生初始治疗必须参考本地区的耐药性分析。
关键词：粘液型和非粘液型铜绿假单胞菌;临床分离特点;耐药性分析
【中图分类号】R322.3 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）09-091-02
铜绿假单胞菌引起的所有感染中，呼吸系统感染是临床进行最常见的。有研究发现，粘液型铜绿假单胞菌是引起弥漫性泛细支气管炎、慢性支气管炎、支气管扩张并感染的重要病原菌之—，生物膜是感染反复发作的关键因素。而非粘液型铜绿假单胞菌已经是院内感染的重要条件致病菌之一，随着广谱抗菌素的应用，多重耐药菌开始流行，监测并分析其耐药性已刻不容缓。本文回顾性分析本地区近3年来收治的因呼吸系统疾病及相关感染疾病（如CAP，HAP，VAP等）而送检的痰和BALF培养结果和耐药谱变迁，从收治科室、基础疾病、药敏结果等分析。
1材料与方法
1.1时间及地点：2018年1月至2019年10月在本院就诊患者
对象：选择在此期间就诊于本院取呼吸道标本培养的病例。
入组条件：革兰氏染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于10个。支气管肺泡灌洗液革兰染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于1%的细胞总数。
1.2仪器与试剂：合肥恒星全自动细菌鉴定仪Hx-21。试剂：微生物培养所用培养平板，手工药敏纸片，质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853 均购自温州康泰。所有试剂均在有效期内使用，仪器室内质控均在控。
1.3实验方法：接到标本后首先进行涂片革兰染色评价标本质量，然后接种哥伦比亚血平板、中国兰、巧克力平板分离单个菌落，按CLSIm100-2017操作方法上机鉴定和药敏。对于涂片产生物被膜革兰阴性杆菌，平板上粘稠、胶胨样菌落，取巧克力平板上菌落以K-B法孵育24小时进行测试。
1.4统计方法：以WHONET5.6统计病例来源、入住科室、药敏数据等。
2结果
本院符合入组条件中共分离出铜绿假单胞菌530株，其中非粘液型铜绿假单胞菌（416株，重症医学科209株），粘液型铜绿假单胞菌（114株）。它们对常用抗生素体外药物敏感性见表1，科室来源构成比见表2。
3讨论
在医院内，铜绿假单胞菌可引起呼吸机相关肺炎、手术切口、植入物感染等。粘液样铜绿假单胞菌在我国是引起弥漫性泛细支气管炎、慢性支气管炎、支气管扩张并感染的重要病原菌之—。
3.1粘液样铜绿假单胞菌的体外药敏对于自动化系统是存在偏差的，因为粘液样菌株通常在24小时内生长不良，所以敏感性可能被高估。而且由于粘液样菌落在无菌盐水中不易乳化，导致0.5麦氏浊度难以调节，研究發现以巧克力平板上的菌落能很好的解决这一问题，我院的实验方法是对于涂片产生物被膜革兰阴性杆菌，平板上粘稠、胶胨样菌落，取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小时进行测试。我院粘液样铜绿假单胞菌主要分离自呼吸科，对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、美罗培南、亚胺培南的敏感率在90%以上，因为不可能清除病原体，患者一般病程长多次就诊，所以可以参照上一次的药物敏感试验进行经验治疗。但有一部分基础病程长，免疫力低下，经常有抗生素暴露的人群已经出现了美罗培南、亚胺培南的耐药，这部分病人应根据药敏试验结果确认下一步的治疗方案。
3.2铜绿假单胞菌天然耐药严重，其对氨苄西林，阿莫西林，阿莫西林/克拉维酸，第一代头孢菌素，第二代头孢菌素，头孢噻肟，头孢曲松，萘啶酸和复方磺胺甲噁唑天然耐药，厄他培南，替加环素及头孢西丁临床对铜绿通常也无效。此次统计结果表明铜绿对亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦，阿米卡星的敏感率在90%以上，对于一般的住院患者，这几类药物可以经验使用，对于氟喹诺酮类药物，环丙沙星比左氧氟沙星表现出更强的杀菌活性。但是对于美罗培南、亚胺培南已经出现7%的耐药率，应防止院内播散。
3.3从重症医学科呼吸道检测出非粘液型铜绿假单胞菌构成比50.24%，在呼吸机相关肺炎中，铜绿假单胞菌出现在第一或第二位，药物敏感性普遍下降，更容易出现多重耐药菌，美罗培南、亚胺培南的耐药性明显增加，常常需要多药联合，临床用药更多依赖于体外药敏结果。
铜绿假单胞菌可能为定植或感染，从革兰氏染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于10个，细菌出现于多形核细胞内的标本分离出的铜绿假单胞菌通常与感染相关，对于涂片被无定形物质包绕革兰阴性杆菌小集群，实验室应报告给医生，提示慢性感染。而且实验室应取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小时进行测试。对于重症医学科，出现多重耐药铜绿假单胞菌几率明显加大，应根据药敏结果适时联合用药。
参考文献
[1]王辉，任健康，王明贵.临床微生物学检验[M].第1版 人民卫生出版社2015：6.
[2]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱[M].第1版人民卫生出版社2010：5.
注：江西省宜春市课题基金项目（编号：JxYC2020KSB032）
作者单位：
江西省丰城市人民医院 检验科 江西丰城 331100
关键词：粘液型和非粘液型铜绿假单胞菌;临床分离特点;耐药性分析
【中图分类号】R322.3 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）09-091-02
铜绿假单胞菌引起的所有感染中，呼吸系统感染是临床进行最常见的。有研究发现，粘液型铜绿假单胞菌是引起弥漫性泛细支气管炎、慢性支气管炎、支气管扩张并感染的重要病原菌之—，生物膜是感染反复发作的关键因素。而非粘液型铜绿假单胞菌已经是院内感染的重要条件致病菌之一，随着广谱抗菌素的应用，多重耐药菌开始流行，监测并分析其耐药性已刻不容缓。本文回顾性分析本地区近3年来收治的因呼吸系统疾病及相关感染疾病（如CAP，HAP，VAP等）而送检的痰和BALF培养结果和耐药谱变迁，从收治科室、基础疾病、药敏结果等分析。
1材料与方法
1.1时间及地点：2018年1月至2019年10月在本院就诊患者
对象：选择在此期间就诊于本院取呼吸道标本培养的病例。
入组条件：革兰氏染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于10个。支气管肺泡灌洗液革兰染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于1%的细胞总数。
1.2仪器与试剂：合肥恒星全自动细菌鉴定仪Hx-21。试剂：微生物培养所用培养平板，手工药敏纸片，质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853 均购自温州康泰。所有试剂均在有效期内使用，仪器室内质控均在控。
1.3实验方法：接到标本后首先进行涂片革兰染色评价标本质量，然后接种哥伦比亚血平板、中国兰、巧克力平板分离单个菌落，按CLSIm100-2017操作方法上机鉴定和药敏。对于涂片产生物被膜革兰阴性杆菌，平板上粘稠、胶胨样菌落，取巧克力平板上菌落以K-B法孵育24小时进行测试。
1.4统计方法：以WHONET5.6统计病例来源、入住科室、药敏数据等。
2结果
本院符合入组条件中共分离出铜绿假单胞菌530株，其中非粘液型铜绿假单胞菌（416株，重症医学科209株），粘液型铜绿假单胞菌（114株）。它们对常用抗生素体外药物敏感性见表1，科室来源构成比见表2。
3讨论
在医院内，铜绿假单胞菌可引起呼吸机相关肺炎、手术切口、植入物感染等。粘液样铜绿假单胞菌在我国是引起弥漫性泛细支气管炎、慢性支气管炎、支气管扩张并感染的重要病原菌之—。
3.1粘液样铜绿假单胞菌的体外药敏对于自动化系统是存在偏差的，因为粘液样菌株通常在24小时内生长不良，所以敏感性可能被高估。而且由于粘液样菌落在无菌盐水中不易乳化，导致0.5麦氏浊度难以调节，研究發现以巧克力平板上的菌落能很好的解决这一问题，我院的实验方法是对于涂片产生物被膜革兰阴性杆菌，平板上粘稠、胶胨样菌落，取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小时进行测试。我院粘液样铜绿假单胞菌主要分离自呼吸科，对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、美罗培南、亚胺培南的敏感率在90%以上，因为不可能清除病原体，患者一般病程长多次就诊，所以可以参照上一次的药物敏感试验进行经验治疗。但有一部分基础病程长，免疫力低下，经常有抗生素暴露的人群已经出现了美罗培南、亚胺培南的耐药，这部分病人应根据药敏试验结果确认下一步的治疗方案。
3.2铜绿假单胞菌天然耐药严重，其对氨苄西林，阿莫西林，阿莫西林/克拉维酸，第一代头孢菌素，第二代头孢菌素，头孢噻肟，头孢曲松，萘啶酸和复方磺胺甲噁唑天然耐药，厄他培南，替加环素及头孢西丁临床对铜绿通常也无效。此次统计结果表明铜绿对亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦，阿米卡星的敏感率在90%以上，对于一般的住院患者，这几类药物可以经验使用，对于氟喹诺酮类药物，环丙沙星比左氧氟沙星表现出更强的杀菌活性。但是对于美罗培南、亚胺培南已经出现7%的耐药率，应防止院内播散。
3.3从重症医学科呼吸道检测出非粘液型铜绿假单胞菌构成比50.24%，在呼吸机相关肺炎中，铜绿假单胞菌出现在第一或第二位，药物敏感性普遍下降，更容易出现多重耐药菌，美罗培南、亚胺培南的耐药性明显增加，常常需要多药联合，临床用药更多依赖于体外药敏结果。
铜绿假单胞菌可能为定植或感染，从革兰氏染色每低倍镜视野鳞状上皮细胞计数小于10个，细菌出现于多形核细胞内的标本分离出的铜绿假单胞菌通常与感染相关，对于涂片被无定形物质包绕革兰阴性杆菌小集群，实验室应报告给医生，提示慢性感染。而且实验室应取巧克力平板上菌落按CLSIm100-2017以K-B法孵育24小时进行测试。对于重症医学科，出现多重耐药铜绿假单胞菌几率明显加大，应根据药敏结果适时联合用药。
参考文献
[1]王辉，任健康，王明贵.临床微生物学检验[M].第1版 人民卫生出版社2015：6.
[2]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱[M].第1版人民卫生出版社2010：5.
注：江西省宜春市课题基金项目（编号：JxYC2020KSB032）
作者单位：
江西省丰城市人民医院 检验科 江西丰城 331100