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目的：构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33 cAMP结合蛋白（CRP）编码基因敲除突变株及基因回复互补株，并探究CRP基因的缺失对细菌生物学特性及毒力的影响。方法：构建中间为壮观霉素抗性基因（Spcr）、两侧为CRP编码基因上下游同源序列的基因敲除质粒，通过同源重组筛选CRP编码基因敲除突变株ΔCRP；构建CRP编码基因的互补质粒，通过电转化敲除株ΔCRP，筛选CRP的基因回复互补株CΔCRP；比较分析突变株、野生株和回复互补株的基本生物学特征的差异，并以小鼠作为动物感染模型对突变株、互补株及野生株的毒力