【摘 要】
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目的探讨信号传导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)对肺泡上皮细胞表面活性物质相关蛋白(surfactant proteins，SP)表达的调控作用。方法构建过表达STAT3的慢病毒并感染人肺泡上皮细胞A549细胞，构建过表达STAT3基因的A549细胞株；设计并化学合成STAT3的小干扰RNA(sma
【机 构】
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210008 南京医科大学附属儿童医院新生儿医疗中心,215600 苏州，张家港市第一人民医院儿科,215600 苏州，张家港市第一人民医院儿科,215600 苏州，张家港市第一人民医院儿科,2100
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目的探讨信号传导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)对肺泡上皮细胞表面活性物质相关蛋白(surfactant proteins，SP)表达的调控作用。
方法构建过表达STAT3的慢病毒并感染人肺泡上皮细胞A549细胞，构建过表达STAT3基因的A549细胞株；设计并化学合成STAT3的小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，在脂质体(Lipofectamine3000)的介导下转染A549细胞，构建沉默STAT3的A549细胞；采用Real-time PCR法分别检测STAT3过表达和沉默后STAT3、SP-A、SP-B、SP-C和SP-D mRNA的表达量，Western blot法检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、SP-A、SP-B、SP-C和SP-D蛋白的表达。
结果通过Real-time PCR和Western blot法检测STAT3的表达，结果证明成功构建了过表达/沉默STAT3的A549细胞株；与空载病毒组(LV5-Mock)相比，过表达STAT3组(LV5-STAT3)的SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白的表达均上调(P<0.05)；与阴性对照组(NC)及转染试剂对照组(Mock)相比，沉默STAT3组(siRNA)SP-A、SP-B、SP-C和SP-D mRNA和蛋白的表达均下调(P<0.05)。
结论STAT3对肺表面活性物质相关蛋白的表达具有调控作用，过表达STAT3基因能够促进SP的表达，沉默STAT3基因抑制SP的表达。
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