【摘 要】
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目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对窒息新生儿血清诱导的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡的影响.方法 以HK-2细胞为研究对象,实验分为对照组(n=8)、窒息组(n=8)、EPO干预组
【机 构】
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四川省自贡市妇幼保健院泸州医学院附属医院,新生儿科,四川,泸州,646000;传染与免疫研究室,四川,泸州,646000;
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目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对窒息新生儿血清诱导的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡的影响.方法 以HK-2细胞为研究对象,实验分为对照组(n=8)、窒息组(n=8)、EPO干预组(n=8)、EPO加5-羟葵酸盐(5-HD)干预组(n=8).对照组采用含100 mL/L胎牛血清的DMEM/F12培养基进行常规培养;窒息组:以新生儿窒息后24 h血清作为攻击因素处理细胞,培养液换成含200 mL/L窒息血清的DMEM/F12培养液;EPO干预组:加入含5×104IU/L EPO的培养基预处理细胞24 h,其他处理同窒息组;EPO加5-HD干预组:加入含有500 μmol/L 5-HD及5×104IU/L EPO的培养基预处理细胞24 h,其他处理同窒息组;在37℃、50 mL/L二氧化碳培养箱中培养24 h后采用流式细胞仪测定各组细胞凋亡率,采用免疫组织化学方法 检测细胞半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达.结果 与对照组比较,窒息组细胞凋亡率明显增加(P<0.05);EPO干预组与窒息组比较,细胞凋亡率明显减少(P<0.05),加入5-HD后,该作用被抑制.与对照组比较,窒息组Caspase-3表达明显增加(P<0.05),而EPO干预组与窒息组比较,Caspase-3表达明显减少(P<0.05),加人5-HD后,该作用被抑制.与对照组比较,窒息组XIAP表达明显减少(P<0.05);EPO干预组与窒息组比较,XIAP表达明显增加(P<0.05),加入5-HD后,该作用被抑制.结论 EPO可减轻窒息新生儿血清诱导的HK-2细胞凋亡,对窒息新生儿具有肾保护作用.
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