【摘 要】
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目的:探讨微小RNA-10b(microRNA-10b)对宫颈癌细胞侵袭迁移能力的影响及机制。方法:实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测microRNA-10b在不同宫颈癌细胞及正常宫颈上皮细
【机 构】
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郑州市妇幼保健院妇产科,郑州大学第三附属医院妇产科
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目的:探讨微小RNA-10b(microRNA-10b)对宫颈癌细胞侵袭迁移能力的影响及机制。方法:实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测microRNA-10b在不同宫颈癌细胞及正常宫颈上皮细胞中的表达情况;脂质体转染microRNA-10b模拟物(microRNA-10b mimics,即mimics组)及microRNA无关序列(microRNA-10b NC,即NC组)至Caski细胞,转染microRNA-10b抑制物(microRNA-10b inhibitor,即inhibitor组)及microRNA inhibitor无关序列(microRNA-10b NC inhibitor,即NC inhibitor组)至He La细胞,转染12 h后,real-time PCR法检测转染效率。采用Transwell试验和划痕试验分别检测microRNA-10b对Caski和He La细胞侵袭迁移能力的影响;real-time PCR及蛋白质印迹(Western blotting)检测各组细胞中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA和蛋白表达水平;荧光素酶报告基因试验检测microRNA-10b对IGF-1R基因表达的调控机制。结果:MicroRNA-10b在宫颈癌细胞中表达水平低于正常宫颈上皮细胞(P<0.05)。MicroRNA-10b表达增加能够降低Caski细胞的侵袭迁移能力(P<0.05),抑制IGF-1R的mRNA和蛋白表达(均P<0.05);而microRNA-10b表达下降能够增强He La细胞的侵袭迁移能力(P<0.05),增加IGF-1R的mRNA和蛋白表达(P均<0.05)。在HEK-293T细胞中,microRNA-10b表达增加能够减弱含有IGF-1R基因3′非翻译区(3′-UTR)的报告质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论:在宫颈癌细胞中,microRNA-10b通过下调IGF-1R基因表达,抑制细胞侵袭迁移能力。
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