【摘 要】
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(目的)分离筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌新菌株,为酶法高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新的酶源。(方法)以乳糖为唯一碳源,碳酸钙溶钙圈和
【基金项目】
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国家自然科学基金(31560432);兵团国际科技合作项目(2017BC012);石河子大学青年创新人才培育计划项目(CXRC201702)
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(目的)分离筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌新菌株,为酶法高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新的酶源。(方法)以乳糖为唯一碳源,碳酸钙溶钙圈和添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳酸细菌培养基(MRS)筛选平板进行初筛,以产酶菌株粗酶液催化乳糖反应产物的TLC分析复筛,获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌。结合其形态学、生理生化特征及16S r RNA序列同源性分析对产转糖基活性β-半乳糖苷酶菌株进行鉴定。单因素实验确定最佳产酶条件和转糖基反应条件,TLC结合HPLC分析转糖基反应产物各组分含量。(结果)筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶的菌株6株,其中Lactobacillus plantarum YLBGNL-S7所产β-半乳糖苷酶的转糖基活性最强。单因素优化实验表明,在温度为50°C、pH6.0、乳糖浓度30%(w/v)的条件下反应4 h,GOS的得率可达43.40%(w/w),其中转移二糖和转移三糖含量分别为18.29%(w/w)和12.95%(w/w)。
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