用阴离子交换层析纯化牛皮蝇素A蛋白的研究

来源 :中国兽医寄生虫病 | 被引量 : 0次 | 上传用户:janmey2007
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建立了用阴离子交换层析AKTAFPLC纯化果蝇S 2细胞分泌的重组牛皮蝇素A(Hypodermotin A,HA)的方法.将诱导培养3天的S2细胞上清液浓缩后,经25mM pH8.5 Tris HCl缓冲液透析,在Mono Q柱上以Tris HCl+NaCl为流动相进行分离.在检测波长280nm处获得蛋白峰.经SDS-PAGE分析,第一峰的分子量与原重组蛋白HA分子量相符,并对明胶大分子具有酶活性;用斑点免疫金渗滤法检测证实对牛皮蝇抗体具有免疫原性.用阴离子交换层析纯化HA的方法具有获得的蛋白质纯度高、操作简便、生产效率高等特点.
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