【摘 要】
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目的 探讨血清和糖皮质激素诱导激酶3 (serum-and glucocorticoid-regulated kinase 3,SGK3)对ER+乳腺癌细胞系MCF-7细胞及T47D细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用基因表达谱交互分析(gene expression profile interactive analysis,GEPIA)生物信息学工具,分析癌症公共数据库癌症基因组图谱计划(the cancer genome atlas program,TCGA)中乳腺癌组织(breast cancer ti
【机 构】
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400016重庆,重庆医科大学药学院药理学系,生物化学与分子药理学重庆高校市级重点实验室,药物代谢研究重庆市重点实验室
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目的 探讨血清和糖皮质激素诱导激酶3 (serum-and glucocorticoid-regulated kinase 3,SGK3)对ER+乳腺癌细胞系MCF-7细胞及T47D细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用基因表达谱交互分析(gene expression profile interactive analysis,GEPIA)生物信息学工具,分析癌症公共数据库癌症基因组图谱计划(the cancer genome atlas program,TCGA)中乳腺癌组织(breast cancer tissue,BRCA)及对照样本中SGK3蛋白的表达水平,基于TCGA数据库中的BRCA患者样本进行生存分析;选取SGK3可诱导表达乳腺癌细胞系MCF-7-Tet-On-SGK3及T47D-Tet-On-SGK3为研究对象,在诱导SGK3过表达后,用MTT法检测过表达SGK3对细胞增殖的影响;流式细胞仪及Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒检测过表达SGK3对细胞凋亡的影响;免疫印迹方法(Western blot)检测凋亡相关蛋白分子的变化.利用SGK3特异性小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)敲低SGK3后,MTT法检测敲低SGK3对细胞增殖的影响.流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westem blot实验检测凋亡相关蛋白分子变化.结果 TCGA数据库共有1084例BRCA样本及492例乳腺对照样本,与对照组乳腺组织相比,SGK3在BRCA中显著高表达.GEPIA的生存曲线分析表明,SGK3高表达患者的总生存期(overall survival,OS)及无病生存期(disease free survival,DFS)较低表达患者缩短.在MCF-7-Tet-On-SGK3和T47D-Tet-On-SGK3细胞中,诱导SGK3过表达能够促进细胞增殖和减少细胞凋亡水平(P<0.05).在分子水平,过表达SGK3能够下调凋亡蛋白Bax和Cleaved-PARP表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2水平(P<0.05).在MCF-7和T47D细胞敲低SGK3能够抑制细胞增殖活力和增加细胞凋亡(P<0.05).在分子水平,敲低SGK3能够增加Bax蛋白水平,降低Bcl-2表达和上调Cleaved-PARP水平(P<0.05).结论 在ER+乳腺癌细胞中,SGK3促进细胞增殖、减少细胞凋亡,其高表达可能与乳腺癌患者预后不良有关.
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