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检测白细胞介素-1β(IL-1β)诱导下哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠关节软骨细胞中表达变化。
方法无菌术下分离出大鼠关节软骨，采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶连续消化法提取细胞，二代软骨细胞经过3 d预培养后，加入不同浓度IL-1作用24 h，通过甲苯胺蓝染色进行细胞表型鉴定后；用倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态学变化；逆转录聚合酶链反应(PCR)检测软骨细胞中Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、mTOR以及核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(P70S6K)基因表达变化；酶联免疫测定mTOR信号通路相关蛋白表达变化。
结果随着IL-1β浓度的增加，软骨细胞表型出现由多角形变成梭形，PCR检测Ⅱ型胶原在各组中的相对表达量(对照组：0.821±0.014；1 ng/ml组：0.614±0.014；10 ng/ml组：0.549±0.009；100 ng/ml组：0.520±0.008)、蛋白聚糖(0.867±0.005；0.857±0.001；0.554±0.008；0.538±0.004)以及mTOR(0.845±0.015；0.785±0.009；0.569±0.025；0.518±0.014)的表达量减少，且各基因组组内表达差异均有统计学意义(均P<0.05)；而P70S6K基因表达量(0.465±0.024；0.566±0.022；0.663±0.022；0.896±0.015)增加，各组表达差异均有统计学意义(均P<0.05)；免疫印迹检测mTOR蛋白以及P70S6K蛋白表达量与PCR检测趋势一致。
结论在软骨细退变过程中mTOR信号通路可能起着重要作用，通过调控mTOR信号通路可能延缓关节软骨退变。