论文部分内容阅读
摘要 目的：建立门氏柴胡理中颗粒定性定量质量标准控制方法。方法：采用薄层色谱法对门氏柴胡理中颗粒制剂中柴胡、黄芩进行薄层鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对柴胡理中颗粒中的黄芩苷进行含量测定，色谱柱为Diamonsil-C18色谱柱（200 mm×4.6 mm，5.0 μm），流动相为甲醇-0.1%醋酸水溶液进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm，柱温为25 ℃，进样量为10 μL.结果：柴胡、黄芩薄层色谱斑点分离清晰，阴性均无干扰;回归方程为y=2 907 186.561 0x+21 224.436 6（r=0.999 8），黄芩苷在0.12～1.20 μg范围内具有良好的线性关系。平均加样回收率为99.45%，RSD为2.48%。结论：建立的方法方便、可靠，可作为门氏柴胡理中颗粒的薄层鉴别和含量测定质量控制方法。
关键词 门氏柴胡理中颗粒;薄层色谱;高效液相色谱法;含量测定;柴胡;黄芩;半夏;黄芩苷
Abstract Objective：To establish a qualitative and quantitative quality standard control method for the Menshi Chaihu Lizhong Granules.Methods：The Bupleurum chinense and Radix Astragali were qualitatively identified by thin-layer chromatography by the Menshi Chaihu Lizhong Granules.The content of baicalin in Menshi Chaihu Lizhong was determined by high performance liquid chromatography.Diamonsil-C18 column（200 mm×4.6 mm，5.0 μm）was used.The mobile phase was gradient eluted with methanol-0.1% aqueous acetic acid，the flow rate is 1.0 mL/min，the detection wavelength is 280 nm，the column temperature is 25 ℃，and the injection volume is 10 μL.Results：The chromatographic spots of Bupleurum chinense and Radix Scutellariae were clearly separated and there was no interference in the negative; the regression equation was y=2 907 186.561 0x+21 224.436 6（r=0.999 8），and baicalin had a good linear relationship in the range of 0.12 μg-1.20 μg.The average recovery was 99.45% and the RSD was 2.48%.Conclusion：The established method is reliable and scientific，and can be used for thin-layer identification andqualitative and quantitative quality control of the Menshi Chaihu Lizhong Granules.
Keywords Menshi Chaihu Lizhong Granules; TLC; HPLC; Content determination; Bupleurum chinense; Scutellariae; Pinellia; Baicalin
門氏柴胡理中颗粒为山西首届名中医门九章的临床经方制剂，由柴胡、半夏、黄芩等多味中药组成，具有清肝补脾利胆等功效;主治往来寒热，疲乏倦怠，心烦易怒，不欲饮食，舌红苔白，脉弦者方中柴胡主要化学成分有皂苷类、挥发油类、黄酮类等[1]，具有抗炎、镇痛、镇咳、抗菌、抗病毒等药理活性[2-6];黄芩主要化学成分有黄酮类、挥发油等[7]，具有抗病毒、抗炎等多种药理作用[8-9]。半夏主要化学成分有生物碱类、聚醇类、其他化合物等[10]，具有镇咳、祛痰、平喘、抗胃溃疡和改善胃功能、抗腹泻等药理作用[11-13]。现在药理学研究表明柴胡与黄芩配伍解热抗炎作用增强并具有抗抑郁作用[14-15]。此经方临床用量大，但多以传统汤剂为主，有煎煮不便、不易携带等缺点，而中药颗粒可直接冲服，适应快节奏社会生活，因此为满足社会需求，将此经方制成颗粒剂，本试验主要对门氏柴胡理中颗粒进行定性定量控制，对制剂中柴胡、半夏、黄芩进行薄层鉴别，并采用高效液相色谱法（HPLC）测定门氏柴胡理中颗粒中黄芩苷的含量，建立门氏柴胡理中颗粒定性定量质量标准，为临床应用奠定基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器 高效液相色谱仪及2998PDA光电二极管矩阵检测器（美国Waters公司，型号：Waters-e2695）;普利赛斯十万分之一电子天平（杭州俊升科学器材有限公司，型号：EP/ES125SM）;万分之一电子天平（上海析平科学仪器有限公司，型号：XP）;小型万能粉碎机（济南科翔实验仪器有限公司，型号：FW80）;紫外仪（北京六一生物科技有限公司，型号：WD-9403C）;实验用干燥箱（上海艾测科技有限公司，型号：A231399）;电热恒温水浴锅（南京威美特科学仪器有限公司，型号：JHF1-DK-S28）;超声波清洗器（济宁科源超声波设备有限公司，型号：KC-240）。 1.2 试剂 柴胡皂苷a对照品（批号：110777-201510，纯度为93.2%），柴胡皂苷d对照品（批号：110778-201510，纯度为95.8%），黄芩苷对照品（批号：110715-201619，纯度为93.5%），汉黄芩素对照品（批号：111514-201605），黄芩素对照品（批号：111595-201607，纯度为98.5%）均购于中国食品药品检定研究院;薄层层析硅胶G板、聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂，规格：10 cm×10 cm），纯水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
1.3 分析样品 门氏柴胡理中颗粒（批号：20171012、2171014、20171015）由山西黄河药业有限公司提供。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 柴胡薄层鉴别 取门氏柴胡理中颗粒8 g，研细，加入50 mL甲醇使溶解，超声15 min，滤过，将滤液挥干后，滤渣加入5 mL水溶解滤渣，溶解后加入水饱和正丁醇液20 mL，置于分液漏斗中振摇萃取3次，将正丁醇液合并，挥干正丁醇液，滤渣加甲醇定容至5 mL，作为供试品溶液[16]。取柴胡皂苷a和柴胡皂苷d对照品一定量，加甲醇配制成浓度为0.5 mg/mL的对照品溶液。另取缺柴胡的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，同法制备柴胡阴性对照溶液。参照2015年版《中华人民共和国药典》通则0502试验[17]，分别吸取上述溶液各12 μL、5 μL、12 μL，点于同一薄层层析硅胶G板，展开剂为乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1），展开，取出，挥干展开剂，喷10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃下加熱至斑点清晰，在供试品与对照品色谱相应的位置上，显现相同颜色的斑点，且阴性无干扰，结果见图1。
2.1.2 黄芩薄层色谱 取门氏柴胡理中颗粒8 g，研细，加入50 mL乙酸乙酯-甲醇（3∶1）的溶液，采用加热回流法加热提取30 min，放冷至室温，将滤液挥干后，滤渣加入5 mL甲醇溶解，取上清液作为供试品溶液。另同法制黄芩对照药材溶液[18]。再制备浓度为0.5、1.0、0.5 mg/mL的黄芩素对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩素对照品溶液。另取缺黄芩的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，同法制备黄芩阴性对照溶液。吸取上述溶液3 μL、2 μL、3 μL、3 μL，点于同一聚酰胺薄膜上，展开剂为甲苯-丙酮-甲醇-乙酸（8∶1∶1∶1），预饱和10 min，展开，取出，挥干展开剂，置紫外光灯（365 nm）下检视。在供试品与黄芩对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点;并与对照品色谱相应的位置上，显3个相同的暗色斑点，且阴性无干扰，结果见图2。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相：甲醇（A）-0.1%醋酸溶液（B），梯度洗脱，洗脱程序见表1;流速：1.0 mL/min;检测波长：280 nm;柱温：25 ℃;进样量：10 μL。
2.2.2 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品一定量加甲醇制成浓度为0.12 mg/mL的黄芩苷对照品溶液[19]。
2.2.3 供试品溶液的制备 称取门氏柴胡理中颗粒5.0 g，称定重量，加甲醇50 mL，称定重量，超声处理20 min，放冷，以甲醇补足失重，滤过，取续滤液为供试品溶液。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 取缺黄芩的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，按照“2.2.3”的方法制成黄芩阴性对照溶液。
2.2.5 专属性考察 分别将上述制备的溶液按“2.2.1”项下的色谱条件下进样检测，进样量为10 μL，试验结果表明，阴性无干扰。见图3。
2.2.6 线性关系考察 精密吸取“2.2.2”项下的对照品储备溶液，分别取0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.6、2.0 mL稀释至2mL容量瓶中，各精密吸取10 μL，按“2.2.1”项下的色谱条件注入高效液相色谱仪检测，记录峰面积。以进样质量（μg）为横坐标，峰面积值为纵坐标进行线性回归，得回归方程为y=2 907 186.561 0x+21 224.436 6（r=0.999 8）。结果表明，黄芩苷在0.12～1.20 μg范围内具有良好的线性关系。
2.2.7 精密度试验 按“2.2.1”项下的色谱条件精密吸取对照品溶液（0.06 mg/mL）10 μL，进样6次检测，记录峰面积，黄芩苷的峰面积RSD为0.84%，表明仪器精密度良好。
2.2.8 稳定性试验 取“2.2.3”项下的供试品溶液10 μL分别于0、2、4、8、10、12 h时进行进样检测，记录峰面积值，黄芩苷的峰面积RSD为2.07%，表明在12 h内样品基本稳定。
2.2.9 重复性试验 称取同一批样品5 g，精密称定，共6份，按照“2.2.3”项下的制备方法制备，按照“2.2.1”项下的色谱条件进行进样测定，样品平均含量为0.526 6 mg/g，RSD为2.13%，表明该方法重复性良好。
2.2.10 加样回收率试验 取样品，研细，精密称取2.5 g，加入黄芩苷对照品1.3 mg，加入甲醇定容至50 mL，超声20 min，按照“2.2.1”项下的色谱条件进行进样测定，平均加样回收率为99.45%，RSD为2.48%，结果见表2。
3 讨论
柴胡的薄层鉴别过程中，供试品制备中样品加甲醇超声处理后，滤过，滤液浓缩后作为供试品，薄层色谱结果斑点拖尾严重，后查阅相关文献[16]，调整供试品制备方法，结果显示柴胡皂苷d斑点几乎看不到，但柴胡皂苷a斑点清晰，参考文献[20]，发现柴胡皂苷d在水煎煮液中会全部转化为柴胡皂苷b2。
黄芩薄层鉴别中展开剂参照《中华人民共和国药典》2015版黄芩项下的薄层色谱条件[18]，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10∶3∶1∶2）为展开剂，饱和30 min，展开后，斑点拖尾严重，后参考文献报道，多次调整展开条件更换展开剂，以甲苯-丙酮-甲醇-冰乙酸（8∶1∶1∶1）为展开剂，结果显示斑点分离清晰。 色谱条件筛选时，实验初期分别以乙腈-0.1%醋酸溶液、甲醇-0.1%甲酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液作为流动相进行了考察，供试品中黄芩苷色谱峰峰形较差，后选用甲醇-0.1%醋酸水进行梯度洗脱时色谱峰分离度高，峰形良好且专属性、重复性较好，可为建立门氏柴胡理中颗粒定性定量质量控制标准提供可靠的方法。
参考文献
[1]陈长勋.中药药理学[M].上海：上海科学技术出版社，2006：39-40.
[2]王丽娜，汪巍，徐驰，等.柴胡醋制前后抗炎作用比较研究[J].中成药，2013，35（5）：1079-1081.
[3]巫丹.柴胡与赤芍、醋柴胡与白芍配伍前后药效学比较[J].亚太传统医药，2017，13（1）：18-19.
[4]程三芳，王文兰，王丽芳，等.太行山野生柴胡解热镇痛作用的临床观察[J].河北中医，2014，36（10）：1489-1491.
[5]王林林，史玉柱，王雪，等.中药抗流感病毒研究进展[J].西北药学杂志，2012，27（6）：600-604.
[6]王惠，刘霞.柴胡属药用植物的鉴别研究[J].中国药事，2019，33（5）：503-512.
[7]杨武德，石平宝，王建科.黄芩生品及不同炮制品中多糖和总糖的含量分析[J].贵阳中医学院学报，2009，31（4）：81-83.
[8]Li YC，Shen JD，Li J，et al.Chronic treatment with baicalin prevents the chronic mild stress-induced depressive-like behavior：involving the inhibition of cyclooxygenase-2 in rat brain[J].Prog Neuropsychhopharmacol Biol Psychiatry，2013，40（2）：138-143.
[9]韦小白，董竞成.黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞的抑制作用及机制研究[J].世界中医药，2014，9（2）：213-217.
[10]翟兴英，张凌，李冰涛，等.采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析半夏药材中的化学成分[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（7）：173-183.
[11]杨冰月，李敏，吴发明，等.基于止咳效价评价半夏及其炮制品品质的方法研究[J].中草药，2015，46（17）：2586-2592.
[12]Du W，Su J，Ye D，et al.Pinellia ternata Attenuates Mucus Secretion and Airway Inflammation after Inhaled Corticosteroid Withdrawal in COPD Rats[J].Am J Chin Med，2016，44（5）：1027-1041.
[13]張明发，沈雅琴.半夏提取物抗菌抗炎及其抗肿瘤药理作用的研究进展[J].抗感染药学，2017，14（6）：1089-1094.
[14]陈慧慧，张敏，虞慧娟，等.柴胡和黄芩配伍解热抗炎作用研究[J].中成药，2011，33（9）：1596-1598.
[15]周丽萍，李国春，章宸一瑜，等.基于均匀设计法评价柴胡-黄芩的配伍比例及抗抑郁机制[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（13）：28-34.
[16]李云静.解郁安神胶囊中柴胡的薄层色谱鉴别[J].农业与技术，2017，37（11）：9-10.
[17]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：57-19.
[18]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：301-302.
[19]沈晨，魏婷婷，韩园园，等.止动颗粒UPLC指纹图谱建立及3种成分测定[J].中草药，2019，50（2）：388-395.
[20]李军，姜华，张延萍，等.柴胡水煎液中柴胡皂苷a和d的溶出与转化差异[J].中国药学杂志，2014，49（19）：1692-1696.
（2019-01-07收稿 责任编辑：张雄杰）
关键词 门氏柴胡理中颗粒;薄层色谱;高效液相色谱法;含量测定;柴胡;黄芩;半夏;黄芩苷
Abstract Objective：To establish a qualitative and quantitative quality standard control method for the Menshi Chaihu Lizhong Granules.Methods：The Bupleurum chinense and Radix Astragali were qualitatively identified by thin-layer chromatography by the Menshi Chaihu Lizhong Granules.The content of baicalin in Menshi Chaihu Lizhong was determined by high performance liquid chromatography.Diamonsil-C18 column（200 mm×4.6 mm，5.0 μm）was used.The mobile phase was gradient eluted with methanol-0.1% aqueous acetic acid，the flow rate is 1.0 mL/min，the detection wavelength is 280 nm，the column temperature is 25 ℃，and the injection volume is 10 μL.Results：The chromatographic spots of Bupleurum chinense and Radix Scutellariae were clearly separated and there was no interference in the negative; the regression equation was y=2 907 186.561 0x+21 224.436 6（r=0.999 8），and baicalin had a good linear relationship in the range of 0.12 μg-1.20 μg.The average recovery was 99.45% and the RSD was 2.48%.Conclusion：The established method is reliable and scientific，and can be used for thin-layer identification andqualitative and quantitative quality control of the Menshi Chaihu Lizhong Granules.
Keywords Menshi Chaihu Lizhong Granules; TLC; HPLC; Content determination; Bupleurum chinense; Scutellariae; Pinellia; Baicalin
門氏柴胡理中颗粒为山西首届名中医门九章的临床经方制剂，由柴胡、半夏、黄芩等多味中药组成，具有清肝补脾利胆等功效;主治往来寒热，疲乏倦怠，心烦易怒，不欲饮食，舌红苔白，脉弦者方中柴胡主要化学成分有皂苷类、挥发油类、黄酮类等[1]，具有抗炎、镇痛、镇咳、抗菌、抗病毒等药理活性[2-6];黄芩主要化学成分有黄酮类、挥发油等[7]，具有抗病毒、抗炎等多种药理作用[8-9]。半夏主要化学成分有生物碱类、聚醇类、其他化合物等[10]，具有镇咳、祛痰、平喘、抗胃溃疡和改善胃功能、抗腹泻等药理作用[11-13]。现在药理学研究表明柴胡与黄芩配伍解热抗炎作用增强并具有抗抑郁作用[14-15]。此经方临床用量大，但多以传统汤剂为主，有煎煮不便、不易携带等缺点，而中药颗粒可直接冲服，适应快节奏社会生活，因此为满足社会需求，将此经方制成颗粒剂，本试验主要对门氏柴胡理中颗粒进行定性定量控制，对制剂中柴胡、半夏、黄芩进行薄层鉴别，并采用高效液相色谱法（HPLC）测定门氏柴胡理中颗粒中黄芩苷的含量，建立门氏柴胡理中颗粒定性定量质量标准，为临床应用奠定基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器 高效液相色谱仪及2998PDA光电二极管矩阵检测器（美国Waters公司，型号：Waters-e2695）;普利赛斯十万分之一电子天平（杭州俊升科学器材有限公司，型号：EP/ES125SM）;万分之一电子天平（上海析平科学仪器有限公司，型号：XP）;小型万能粉碎机（济南科翔实验仪器有限公司，型号：FW80）;紫外仪（北京六一生物科技有限公司，型号：WD-9403C）;实验用干燥箱（上海艾测科技有限公司，型号：A231399）;电热恒温水浴锅（南京威美特科学仪器有限公司，型号：JHF1-DK-S28）;超声波清洗器（济宁科源超声波设备有限公司，型号：KC-240）。 1.2 试剂 柴胡皂苷a对照品（批号：110777-201510，纯度为93.2%），柴胡皂苷d对照品（批号：110778-201510，纯度为95.8%），黄芩苷对照品（批号：110715-201619，纯度为93.5%），汉黄芩素对照品（批号：111514-201605），黄芩素对照品（批号：111595-201607，纯度为98.5%）均购于中国食品药品检定研究院;薄层层析硅胶G板、聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂，规格：10 cm×10 cm），纯水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
1.3 分析样品 门氏柴胡理中颗粒（批号：20171012、2171014、20171015）由山西黄河药业有限公司提供。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 柴胡薄层鉴别 取门氏柴胡理中颗粒8 g，研细，加入50 mL甲醇使溶解，超声15 min，滤过，将滤液挥干后，滤渣加入5 mL水溶解滤渣，溶解后加入水饱和正丁醇液20 mL，置于分液漏斗中振摇萃取3次，将正丁醇液合并，挥干正丁醇液，滤渣加甲醇定容至5 mL，作为供试品溶液[16]。取柴胡皂苷a和柴胡皂苷d对照品一定量，加甲醇配制成浓度为0.5 mg/mL的对照品溶液。另取缺柴胡的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，同法制备柴胡阴性对照溶液。参照2015年版《中华人民共和国药典》通则0502试验[17]，分别吸取上述溶液各12 μL、5 μL、12 μL，点于同一薄层层析硅胶G板，展开剂为乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1），展开，取出，挥干展开剂，喷10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃下加熱至斑点清晰，在供试品与对照品色谱相应的位置上，显现相同颜色的斑点，且阴性无干扰，结果见图1。
2.1.2 黄芩薄层色谱 取门氏柴胡理中颗粒8 g，研细，加入50 mL乙酸乙酯-甲醇（3∶1）的溶液，采用加热回流法加热提取30 min，放冷至室温，将滤液挥干后，滤渣加入5 mL甲醇溶解，取上清液作为供试品溶液。另同法制黄芩对照药材溶液[18]。再制备浓度为0.5、1.0、0.5 mg/mL的黄芩素对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩素对照品溶液。另取缺黄芩的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，同法制备黄芩阴性对照溶液。吸取上述溶液3 μL、2 μL、3 μL、3 μL，点于同一聚酰胺薄膜上，展开剂为甲苯-丙酮-甲醇-乙酸（8∶1∶1∶1），预饱和10 min，展开，取出，挥干展开剂，置紫外光灯（365 nm）下检视。在供试品与黄芩对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点;并与对照品色谱相应的位置上，显3个相同的暗色斑点，且阴性无干扰，结果见图2。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相：甲醇（A）-0.1%醋酸溶液（B），梯度洗脱，洗脱程序见表1;流速：1.0 mL/min;检测波长：280 nm;柱温：25 ℃;进样量：10 μL。
2.2.2 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品一定量加甲醇制成浓度为0.12 mg/mL的黄芩苷对照品溶液[19]。
2.2.3 供试品溶液的制备 称取门氏柴胡理中颗粒5.0 g，称定重量，加甲醇50 mL，称定重量，超声处理20 min，放冷，以甲醇补足失重，滤过，取续滤液为供试品溶液。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 取缺黄芩的门氏柴胡理中颗粒阴性样品，按照“2.2.3”的方法制成黄芩阴性对照溶液。
2.2.5 专属性考察 分别将上述制备的溶液按“2.2.1”项下的色谱条件下进样检测，进样量为10 μL，试验结果表明，阴性无干扰。见图3。
2.2.6 线性关系考察 精密吸取“2.2.2”项下的对照品储备溶液，分别取0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.6、2.0 mL稀释至2mL容量瓶中，各精密吸取10 μL，按“2.2.1”项下的色谱条件注入高效液相色谱仪检测，记录峰面积。以进样质量（μg）为横坐标，峰面积值为纵坐标进行线性回归，得回归方程为y=2 907 186.561 0x+21 224.436 6（r=0.999 8）。结果表明，黄芩苷在0.12～1.20 μg范围内具有良好的线性关系。
2.2.7 精密度试验 按“2.2.1”项下的色谱条件精密吸取对照品溶液（0.06 mg/mL）10 μL，进样6次检测，记录峰面积，黄芩苷的峰面积RSD为0.84%，表明仪器精密度良好。
2.2.8 稳定性试验 取“2.2.3”项下的供试品溶液10 μL分别于0、2、4、8、10、12 h时进行进样检测，记录峰面积值，黄芩苷的峰面积RSD为2.07%，表明在12 h内样品基本稳定。
2.2.9 重复性试验 称取同一批样品5 g，精密称定，共6份，按照“2.2.3”项下的制备方法制备，按照“2.2.1”项下的色谱条件进行进样测定，样品平均含量为0.526 6 mg/g，RSD为2.13%，表明该方法重复性良好。
2.2.10 加样回收率试验 取样品，研细，精密称取2.5 g，加入黄芩苷对照品1.3 mg，加入甲醇定容至50 mL，超声20 min，按照“2.2.1”项下的色谱条件进行进样测定，平均加样回收率为99.45%，RSD为2.48%，结果见表2。
3 讨论
柴胡的薄层鉴别过程中，供试品制备中样品加甲醇超声处理后，滤过，滤液浓缩后作为供试品，薄层色谱结果斑点拖尾严重，后查阅相关文献[16]，调整供试品制备方法，结果显示柴胡皂苷d斑点几乎看不到，但柴胡皂苷a斑点清晰，参考文献[20]，发现柴胡皂苷d在水煎煮液中会全部转化为柴胡皂苷b2。
黄芩薄层鉴别中展开剂参照《中华人民共和国药典》2015版黄芩项下的薄层色谱条件[18]，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10∶3∶1∶2）为展开剂，饱和30 min，展开后，斑点拖尾严重，后参考文献报道，多次调整展开条件更换展开剂，以甲苯-丙酮-甲醇-冰乙酸（8∶1∶1∶1）为展开剂，结果显示斑点分离清晰。 色谱条件筛选时，实验初期分别以乙腈-0.1%醋酸溶液、甲醇-0.1%甲酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液作为流动相进行了考察，供试品中黄芩苷色谱峰峰形较差，后选用甲醇-0.1%醋酸水进行梯度洗脱时色谱峰分离度高，峰形良好且专属性、重复性较好，可为建立门氏柴胡理中颗粒定性定量质量控制标准提供可靠的方法。
参考文献
[1]陈长勋.中药药理学[M].上海：上海科学技术出版社，2006：39-40.
[2]王丽娜，汪巍，徐驰，等.柴胡醋制前后抗炎作用比较研究[J].中成药，2013，35（5）：1079-1081.
[3]巫丹.柴胡与赤芍、醋柴胡与白芍配伍前后药效学比较[J].亚太传统医药，2017，13（1）：18-19.
[4]程三芳，王文兰，王丽芳，等.太行山野生柴胡解热镇痛作用的临床观察[J].河北中医，2014，36（10）：1489-1491.
[5]王林林，史玉柱，王雪，等.中药抗流感病毒研究进展[J].西北药学杂志，2012，27（6）：600-604.
[6]王惠，刘霞.柴胡属药用植物的鉴别研究[J].中国药事，2019，33（5）：503-512.
[7]杨武德，石平宝，王建科.黄芩生品及不同炮制品中多糖和总糖的含量分析[J].贵阳中医学院学报，2009，31（4）：81-83.
[8]Li YC，Shen JD，Li J，et al.Chronic treatment with baicalin prevents the chronic mild stress-induced depressive-like behavior：involving the inhibition of cyclooxygenase-2 in rat brain[J].Prog Neuropsychhopharmacol Biol Psychiatry，2013，40（2）：138-143.
[9]韦小白，董竞成.黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞的抑制作用及机制研究[J].世界中医药，2014，9（2）：213-217.
[10]翟兴英，张凌，李冰涛，等.采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析半夏药材中的化学成分[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（7）：173-183.
[11]杨冰月，李敏，吴发明，等.基于止咳效价评价半夏及其炮制品品质的方法研究[J].中草药，2015，46（17）：2586-2592.
[12]Du W，Su J，Ye D，et al.Pinellia ternata Attenuates Mucus Secretion and Airway Inflammation after Inhaled Corticosteroid Withdrawal in COPD Rats[J].Am J Chin Med，2016，44（5）：1027-1041.
[13]張明发，沈雅琴.半夏提取物抗菌抗炎及其抗肿瘤药理作用的研究进展[J].抗感染药学，2017，14（6）：1089-1094.
[14]陈慧慧，张敏，虞慧娟，等.柴胡和黄芩配伍解热抗炎作用研究[J].中成药，2011，33（9）：1596-1598.
[15]周丽萍，李国春，章宸一瑜，等.基于均匀设计法评价柴胡-黄芩的配伍比例及抗抑郁机制[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（13）：28-34.
[16]李云静.解郁安神胶囊中柴胡的薄层色谱鉴别[J].农业与技术，2017，37（11）：9-10.
[17]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：57-19.
[18]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：301-302.
[19]沈晨，魏婷婷，韩园园，等.止动颗粒UPLC指纹图谱建立及3种成分测定[J].中草药，2019，50（2）：388-395.
[20]李军，姜华，张延萍，等.柴胡水煎液中柴胡皂苷a和d的溶出与转化差异[J].中国药学杂志，2014，49（19）：1692-1696.
（2019-01-07收稿 责任编辑：张雄杰）