【摘 要】
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目的:观察克隆的人穿孔素(perforin, PFN)基因在HepG-2细胞中的表达及其对转染的HepG-2细胞的作用. 方法: 用RT-PCR方法获取人PFN cDNA. 将所获基因克隆入真核表达载体pcDNA3
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，国家自然科学基金
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目的:观察克隆的人穿孔素(perforin, PFN)基因在HepG-2细胞中的表达及其对转染的HepG-2细胞的作用. 方法: 用RT-PCR方法获取人PFN cDNA. 将所获基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-A,转染HepG-2细胞. 间接免疫荧光法检测目的蛋白表达,电镜观察转染细胞的形态和结构变化,细胞计数检测转染目的基因后细胞的增殖情况. 结果:成功获得人PFN全长cDNA,并构建了真核表达载体. 转染HepG-2细胞后,检测出目的蛋白的表达. 细胞计数发现细胞增殖被明显抑制. 电镜观察显
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