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背景与目的:本实验研究缺氧诱导因子HIF-1α反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotides,ASODN)在缺氧环境下对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α、P53、Bcl-2表达及细胞凋亡的影响,进一步探讨HIF-1α在缺氧诱导肿瘤细胞凋亡的过程中的作用机制。方法:设计针对HIF-1αRNA亚基的反义、正义寡核苷酸(senseoligodeoxynucleoti-des,SODN),并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型,观察缺氧培养不同时相(8、16、24h)5μmol/L的HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α、P53、Bcl-2表达及细胞凋亡的影响。半定量RT-PCR方法检测HIF-1α、P53和Bcl-2mRNA的转录水平,免疫组化(SP法)和免疫印迹(WesternBlot)检测HIF-1α、P53和Bcl-2蛋白表达情况。流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:HIF-1α转录水平(8~24h)单纯缺氧组(22.0%~22.6%)及SODN缺氧组(22.0%~22.8%)与常氧组(20.2%~20.9%)比较未见明显改变,而在ASODN缺氧组(16.8%~18.5%)显著降低(P<0.01)。其蛋白表达单纯缺氧组(33.1%~88.9%)、SODN缺氧组(32.5%~88.7%)随缺氧时间延长明显升高;而P53、Bcl-2mRNA水平单纯缺氧组、SODN缺氧组较常氧组均显著增强(3.4~7.5倍不等)(P<0.05)。其蛋白的表达这二组也较常氧组均显著增强(2~大于37倍不等)(P<0.05)。然而在ASODN缺氧组P53、Bcl-2mR-NA活性明显减弱(11.5%~13.9%)(P<0.05),蛋白表达水平也显著降低(13.6%~35.4%)(P<0.05);细胞凋亡率其他三组未见明显变化,但ASODN缺氧组显著增加(P<0.05)。结论:缺氧可以通过诱导野生型P53的突变使HIF-1α和Bcl-2的过表达,从而抑制肿瘤细胞的凋亡。而HIF-1α反义寡核苷酸抑制HIF-1α活性后,可以抑制野生型P53的突变,降低Bcl-2的表达,导致细胞凋亡的增加。