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目的
探讨如何建立肾缺血再灌注损伤小鼠血清致肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤模型。
方法培养小鼠PMVECs，测定单层PMVECs标准电阻。待PMVECs生长成单层致密连接状态且达到标准电阻时，采用随机数字表法，将其分为4组(n＝3)：正常小鼠血清组(NS组)和不同浓度肾缺血再灌注损伤小鼠血清组(IRS5组、IRS10组和IRS20组)。换成无血清内皮细胞培养基饥饿处理1 h后，NS组上室和下室分别加入含20%正常小鼠血清的内皮细胞培养基0.8和0.2 ml进行培养；IRS5组、IRS10组和IRS20组上室和下室分别加入含5%、10%、20%肾缺血再灌注损伤小鼠血清的内皮细胞培养基0.8和0.2 ml进行培养。4组均在上室中加入100 μg/ml FITC-BSA 100 μl作为通透物质。分别于培养3、6、9、12、15、18、21和24 h时，采用荧光白蛋白滤过法检测PMVECs的通透性，以通透系数(Pa)表示。
结果与NS组比较，IRS5组培养12和15 h时Pa升高，IRS10组和IRS20组培养6～24 h时Pa升高(P<0.05)；与IRS5组比较，IRS10组培养21和24 h时Pa升高，IRS20组培养9～24 h时Pa升高(P<0.05)；与IRS10组比较，IRS20组培养15～24 h时Pa升高(P<0.05)。
结论10%和20%肾缺血再灌注损伤小鼠血清均可成功建立PMVECs损伤模型，其中20%血清时损伤更为明显。