pSH-CUP重组质粒的构建及面包酵母酸性海藻糖酶基因的敲除

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gui_123456

【摘要】

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设计含有与面包酵母（Saccharomyces cerevisiae BY-6）编码酸性海藻糖酶ATH基因内部部分序列同源的长引物，以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre／loxP系统的敲除单元，转化面包酵母获

【作者】

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和东芹肖冬光吕烨

【机构】

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天津科技大学天津市工业微生物重点实验室,邯郸职业技术学院

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

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2008年2期

【关键词】

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面包酵母基因敲除铜抗性 pSH-CUP重组质粒构建酸性海藻糖酶 baker＇s yeast gene disruption copper-resistan

【基金项目】

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高等学校博士学科点专项科研基金资助项目（20050057001）

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设计含有与面包酵母（Saccharomyces cerevisiae BY-6）编码酸性海藻糖酶ATH基因内部部分序列同源的长引物，以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre／loxP系统的敲除单元，转化面包酵母获得G418阳性克隆。将铜抗性基因（CUP1-MT1）导入Cre重组酶表达质粒pSH47，得到重组质粒pSH—CUP,并转化阳性克隆，以铜抗性筛选面包酵母转化子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kan^r基因。重组质粒pSH．CUP的构建，不仅解决了酵母转化子筛选标记问题和非酵母基因的引入，而且使Lo

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