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目的
探索超声辐照微泡介导腺相关病毒(AAV)对不同细胞的转染和细胞内吞活动。
方法以不同梯度浓度的携增强型绿色荧光基因的重组腺相关病毒2型(rAAV2-EGFP)转染人宫颈癌细胞(HeLa)和小鼠成纤维细胞(NIH/3T3)细胞，分别获得最佳可提高基础浓度。以此浓度，超声辐照微泡介导rAAV2-EGFP转染HeLa和NIH/3T3细胞后48 h荧光显微镜观察和流式细胞仪检测EGFP基因转染效率，并采用CCK-8检测其安全性。超声辐照微泡介导AAV转染后45 min，采用免疫荧光的方法共聚焦显微镜和透射电镜观察细胞膜内网格蛋白包裹的内吞泡的数量和分布。
结果rAAV2-EGFP转染HeLa和NIH/3T3细胞的最佳可提高浓度分别为2 000 v．g./cell和10 000 v．g./cell。超声辐照微泡可显著提高rAAV2-EGFP对HeLa和NIH/3T3细胞的转染效率(P<0.01)，而细胞活性无显著下降(P>0.05)。共聚焦显微镜和电镜显示，超声辐照微泡介导后，细胞膜内侧面网格蛋白包裹的内吞泡明显增多。
结论超声辐照微泡可提高有赖于细胞转运的AAV病毒颗粒对两种不同细胞的基因转染，激活细胞内吞活动可能是超声辐照微泡促进AAV转运的机制之一。