1,25-二羟基维生素D3调控腹膜纤维化大鼠结缔组织生长因子和热休克蛋白47的表达

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hou_sen
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目的

观察腹膜纤维化大鼠模型中结缔组织生长因子(CTGF)和热休克蛋白47(HSP47)在腹膜中的表达,探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2-VitD3]抑制腹膜纤维化的可能机制。

方法

按随机数字表法将6周龄雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠分为3组:对照组(n=8)、模型组(n=8)和1,25-(OH)2-VitD3(VitD3)组(n=8)。腹腔注射含有0.1%葡萄糖和15%乙醇的氯己定(CHX)溶液0.2 ml/d构建腹膜纤维化(PF)模型。VitD3组于造模当日开始腹腔注射1,25-(OH)2-VitD3[6 ng·(100 g)-1·d-1]。4周后,观察各组大鼠腹膜转运功能、肾功能、腹膜厚度及血清25羟基维生素D3水平。原代培养SD大鼠腹膜间皮细胞分组为:对照组、高糖诱导组(HG,2.5%)、CTGF siRNA干预组(CTGF siRNA+HG)、VitD3干预组(VitD3+HG)和联合干预组(CTGF siRNA+VitD3+HG)。采用荧光定量PCR、Western印迹和免疫荧光检测CTGF和HSP47,ELISA检测纤维连接蛋白(FN)在腹膜组织和腹膜间皮细胞中的表达。

结果

与对照组相比,模型组大鼠腹膜超滤量明显降低(P<0.05),腹膜厚度和腹透液尿素氮/血尿素氮(DUN/BUN)比值增加(均P<0.05),腹膜组织CTGF及HSP47的表达均明显增加(均P<0.05)。应用1,25-(OH)2-VitD3干预后,大鼠腹膜纤维化程度明显改善(P<0.05),腹膜厚度下降(P<0.05),CTG及HSP47的表达明显减少(均P<0.05)。体外实验,经CTGF siRNA、1,25-(OH)2-VitD3和二者联合分别干预2.5%高糖诱导的腹膜间皮细胞,FN、CTGF及HSP47的表达量较高糖组均明显减少(均P<0.05)。

结论

腹膜纤维化模型大鼠腹膜CTGF和HSP47的表达明显增加,1,25-(OH)2-VitD3可能通过下调CTGF的表达,降低HSP47和FN的表达,从而改善腹膜纤维化。

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