【摘 要】
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从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT-PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增.结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMDl8-T-Vec
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,江苏出入境检验检疫局
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从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT-PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增.结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMDl8-T-Vector中.进行序列测定,证实为WNV的基因.建立了套式RT-PCR检测方法,经各反应条件的优化后,发现2套nest-PCR引物能分别扩增出85个拷贝和62个拷贝的双链DNA,对乙型脑炎病毒、黄熟病毒等11种病毒核酸进行扩增,发现具有良好的特异性,显示建立套式RT-PCR具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸WNV的检测和监测.
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