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目的:克隆乳胶主要过敏原Hev b3基因,构建其原核表达裁体并表达和纯化重组蛋白,了解重组的Hev b3是否具有和相应IgE特异结合的过敏原特性。方法:用RT—PCR方法从新鲜海南橡胶树叶提取的总RNA中扩增出Hev b3的cDNA,将其克隆于原核表达载体pQE30质粒,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶切和测序验证构建的载体,利用Ni—NTA柱层析纯化重组蛋白并用SDS—PAGE和Western Blot验证。结果:酶切和测序结果证实克隆了正确的Hev b3序列,重组表达并纯化的蛋白具有和特异IgE抗体结