人类野生型及突变型PPARγ基因真核表达质粒的构建和鉴定

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目的 构建人类野生型过氧化物酶增殖物激活受体γ (PPARγ)及其突变型PPARγMut基因的真核表达质粒.方法 采用RT-PCR和重叠延伸PCR技术扩增人类野生型及功能区缺失的突变型PPARγ全长序列,通过DNA重组技术分别将其重组于pcDNA3.1-Myc载体,构建myc标记的PPARγWT及PPARγMut融合蛋白表达质粒,通过酶切电泳分析和DNA测序的方法对重组表达质粒进行鉴定.结果 通过酶切电泳和测序结果 证实,构建的重组表达质粒目的 基因片段为人类野生型PPARγ及突变型PPARγMut的cDNA.结论 成功构建野生型及其功能区缺失的突变型PPARγ质粒,为进一步探讨PPARγ基因在乳腺癌发生和发展中的作用奠定了基础.
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