定点突变去除抗乙酰胆碱受体抗体的补体结合功能

来源 :延边大学医学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhjzhouji
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[目的]制备无补体结合功能的免疫球蛋白样抗乙酰胆碱受体抗体,用于重症肌无力的特异性免疫治疗.[方法]应用定点突变技术,将致病性抗乙酰胆碱受体抗体IgG637的重链CH2区的第322位氨基酸进行K322A突变,获得的突变型抗体IgG637/K322A基因经转化大肠杆菌XL1-Blue进行增殖,测定序列证实为突变序列,转染哺乳类细胞CHO-k1进行表达,其产物经酶联免疫吸附试验检测与补体C1q的结合活性.[结果]突变型抗乙酰胆碱受体抗体IgG637/K322A不能与补体C1q结合,而对照抗体IgG637可与补体结合.[结论]经定点突变,成功地获得了失去补体结合功能的抗乙酰胆碱受体抗体.
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