【摘 要】
：
目的 联合重组酶聚合酶扩增及电化学DNA传感器检测技术,建立一种敏感、特异且简单的日本血吸虫(Schistosoma japonicum)核酸检测方法. 方法 提取日本血吸虫基因组DNA,以SjR2
【机 构】
：
中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,国家热带病研究中心,世界卫生组织热带病合作中心,科技部国家级热带病国际联合研究中心,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海200025;复旦大学生命科学学
论文部分内容阅读
目的 联合重组酶聚合酶扩增及电化学DNA传感器检测技术,建立一种敏感、特异且简单的日本血吸虫(Schistosoma japonicum)核酸检测方法. 方法 提取日本血吸虫基因组DNA,以SjR2基因片段为靶序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)引物与探针,与电化学DNA传感器(EC)检测技术联合,将探针固定于多通道电极芯片进行界面RPA扩增及电化学检测,建立日本血吸虫核酸等温检测方法.优化RPA反应条件,通过检测10-4、10-5、10-6、10-7、10-s ng日本血吸虫基因组DNA,评价RPA-EC方法的敏感性;通过检测10 ng日本血吸虫、埃及血吸虫、曼氏血吸虫、卫氏并殖吸虫、大片吸虫及华支睾吸虫的基因组DNA,评价RPA-EC方法的特异性.取10只6～8周龄C57成年小鼠,每鼠经腹部贴片感染40条日本血吸虫尾蚴,分别于感染前(0 d)和感染后7、21、35 d收集尾静脉血清,验证RPA-EC方法检测感染动物动态血清DNA中SjR2基因片段的可行性. 结果 RPA-EC联合检测方法可在37℃、30 min内完成SjR2基因片段的界面快速扩增及检测,成虫基因组DNA的最低检出限可达10-8 ng,与曼氏血吸虫、埃及血吸虫、卫氏并殖吸虫、大片吸虫及华支睾吸虫基因组DNA无交叉反应,具有较好的特异性.日本血吸虫感染小鼠实验结果显示,RPA-EC联合检测方法可高敏感检出感染后7、21、35 d等不同感染期小鼠血清中的SjR2基因片段. 结论 本研究所建立的RPA-EC联合检测方法敏感性高、特异性好、操作简便,具有一定的应用前景.
其他文献
现代高中,教育层次分化明确,教学手段有了长足的改进,就艺术教学来说,基本摆脱了原有的传统模式,形成了一种结合新型科技元素共同教学的手段。成都龙泉二中是四川省教委1989
“让每个学生全面发展,让每个教职工幸福工作。”是我校的办学理念,也是我校的发展特色。我们注重统一思想观念、加强人本关怀、强化人才培养、做好优质服务,促进学校基础建
教育均衡，即教育均衡发展。在我国构建社会主义和谐社会的进程中，人们对教育公平问题的关注程度显著提高。教育均衡发展，是关系到当前和今后一个时期中国基础教育发展的整体战略
“细节决定成败”正逐渐成为学校常规管理精细化的精髓宗旨。简言之，精细化就是注重细节，最大限度地优化每一个细节，把工作做“精致”，使之成为“精品”，并使之成为工作常规，成为固
目的 比较3种不同检测方法对疟疾无症状感染者的检出能力,并了解中缅边境地区的疟疾无症状感染水平. 方法 2014年7月在中缅边境地区云南省盈江县选择那邦镇、支那乡和缅甸拉
新中国教育已经走过了六十余个年头,如果再上溯到新文化运动,则可以说中国现代意义上的教育已经推行了百年有余。但是当我们认真地审视我们的教育发展之路时,便会发现其中有
目的 了解2018年全国内脏利什曼病的疫情状况. 方法 收集2018年中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统中全国内脏利什曼病病例信息,剔除疑似病例、重复病例以及皮肤利
《中国教育改革和发展纲要》中明确指出:“中小学要由‘应试教育’转向全面提高国民素质的轨道,面向全体学生,全面提高学生思想道德、文化科学、劳动技能和身体心理素质,促进
我校党员人数约占教职工总数的1/3,其中35岁以下党员原来只占党员总数的13.6%,多数党员在40岁以上,还有近20%的党员接近离退休年龄。党员年龄严重老化,已不适应学校工作和事