【摘 要】
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目的 探讨酪氨酸酶-黑色素系统作为MR报告基因的可行性.方法 将pcDNA3.0空白质粒和不同数量的pcDNA3.0-tyr重组质粒分别转染HepG2细胞,培养72 h后行MRI T1WI序列扫描,测量各
【机 构】
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529030,江门市中心医院放射科;510120,中山大学孙逸仙纪念医院放射科
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目的 探讨酪氨酸酶-黑色素系统作为MR报告基因的可行性.方法 将pcDNA3.0空白质粒和不同数量的pcDNA3.0-tyr重组质粒分别转染HepG2细胞,培养72 h后行MRI T1WI序列扫描,测量各组细胞的信号强度.将信号强度最高组细胞分为不同细胞数量组,行MRI T1WI扫描并测量其信号强度.采用单因素方差分析及最小显著差异t检验比较各组间的信号强度差别.采用实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞内酪氨酸酶mRNA的转录水平,Masson-Fontana浸银法及电镜检查验证细胞内黑色素的合成.结果 阴性对照组细胞的MRI T1WI信号强度明显低于实验组.实验组细胞的信号强度随转染质粒量的增多而增高(F=801.024,P＜0.05).信号强度最高组细胞随细胞数量的减少,细胞团信号逐渐减弱(F=743.876,P＜0.05),当细胞数量约为14000个时仅见微弱信号,当减少到约6000个时,接近背景信号.实时荧光定量RT-PCR检测到实验组细胞内大量的酪氨酸酶基因cDNA片段,Masson-Fontana染色、电镜检查均检测到实验组细胞内黑色素的表达.结论 酪氨酸酶-黑色素系统可以作为MR报告基因反映体外细胞的基因转染情况.
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