探究长链非编码RNA生长阻滞特异转录物5/微小RNA 200c－3p/血管紧张素转换酶2(lncRNA GAS5/miR－200c－3p/ACE2)信号轴是否参与呼吸窘迫综合征(ARDS)肺上皮细胞的凋亡。

构建ARDS大鼠模型，实验分为对照组(Control组)、LPS处理组(ARDS组)、LPS＋pcDNA处理组(ARDS＋pcDNA组)和LPS＋pcDNA－GAS5处理组(ARDS＋pcDNA－GAS5组)。ARDS大鼠构建6 h后收集4组大鼠动脉血及肺组织，血气分析仪进行测定氧分压(PaO₂)和二氧化碳分压(PaCO₂)，并观察GAS5的表达变化。随后，用LPS处理人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549，分为未处理、LPS、LPS＋pcDNA、LPS＋pcDNA－GAS5、LPS＋pcDNA－GAS5＋pre－NC和LPS＋pcDNA－GAS5＋miR－200c－3p mimic组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT－PCR)检测lncRNA GAS5、ACE2和miR－200c－3p的表达水平；RNA免疫沉淀和RNA下拉(pull－down)实验用于检测GAS5与miR－200c－3p的结合与调控；Western blotting法检测ACE2的蛋白表达；流式细胞术用于检测A549细胞的凋亡。组间数据比较采用t检验。

ARDS大鼠实验表明与ARDS＋pcDNA组相比，ARDS＋pcDNA－GAS5组PO₂值显著升高[(81.5±3.3)比(57.5±5.1)mmHg，t＝4.850，P<0.05]，PCO₂值显著降低[(50.6±1.9)比(64.0±1.9)mmHg，t＝5.940，P<0.05]。细胞实验中，与Control组相比，LPS组A549细胞中lncRNA GAS5的表达显著下降(0.43±0.01比1.01±0.01，t＝0.242，P<0.05)。与LPS＋pcDNA组相比，LPS＋pcDNA－GAS5组ACE2的表达水平显著升高(0.85±0.04比0.34±0.02，t＝1.800，P<0.05)；与LPS＋pcDNA－GAS5＋pre－NC组相比，LPS＋pcDNA－GAS5＋miR－200c－3p mimic组ACE2的表达水平显著降低(0.62±0.01比0.84±0.02，t＝9.440，P<0.05)。与未处理组相比，LPS组A549细胞凋亡百分比明显升高(25.90±0.61比7.90±0.22，t＝0.257，P<0.05)；与LPS＋pcDNA组相比，LPS＋pcDNA－GAS5组凋亡百分比明显降低(10.50±0.37比26.37±0.45，t＝1.760，P<0.05)；与LPS＋pcDNA－GAS5＋pre－NC组相比，LPS＋pcDNA－GAS5＋miR－200c－3p mimic组细胞凋亡百分比显著升高(19.07±0.56比10.87±0.26，t＝0.643，P<0.05)。

ARDS模型中，lncRNA GAS5下调促进miR－200c－3p表达，使ACE2表达下降，从而使肺上皮细胞凋亡增加，促进ARDS进展。