目的 建立小鼠Th17细胞体外培养方法并研究姜黄素对Th17细胞分化、功能的影响及机制.方法 分离、纯化小鼠脾脏CD4+CD25-T细胞,培养体系内加入抗CD3、抗CD28抗体活化,并加入转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6、IL-23、抗干扰素-γ抗体、抗IL-2抗体等促进Th17细胞分化.培养的Th17细胞分为对照组、姜黄素低剂量(5 μmol/L)及高剂量(25 μmol/L)组、西罗莫司(100 ng/ml)组.流式细胞术检测Th17细胞比例,荧光定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白印迹法检测视黄酸相关孤儿受体(ROR)γt表达水平及信号转导和转录活化因子(STAT)3磷酸化水平,最后检测细胞IL-17A、IL-21mRNA相对表达量.采用t检验、单因素方差分析对实验结果进行统计学处理.结果 本方案可明显促进Th17细胞分化.与对照组相比,姜黄素低组、高剂量组及西岁莫司组Th17细胞比例明显降低[分别为(54.1±3.4)%、(40.3±2.8)%、(25.8±2.3)%、(25.0±2.0)%,t值为6.15,12.63,12.97,P值均<0.01].姜黄素低剂量组、高剂量组及西罗莫司组RORγt的mRNA水平、蛋白水平、STAT3磷酸化水平以及IL-17A、IL-21mRNA水平均较对照组明显降低[(IL-17A mRNA分别为0.81±0.05,0.61±0.05,0.58±0.05,1.01±0.11,t值为4.81,8.52,8.89,;IL-21 mRNA分别为0.73±0.06,0.49±0.03,0.59±0.03,1.12±0.11,t值为5.98,9.22,7.95;P值均<0.01],且姜黄素高剂量组IL-21 mRNA水平较西罗莫司组降低(P<0.05).结论 姜黄素体外可以抑制小鼠脾脏CD4+CD25-T细胞向Th17细胞分化,并抑制IL-17A、IL-21 mRNA合成,其机制可能与抑制细胞内孤儿受体RORγt表达及STAT3磷酸化有关。