高通量测序分析脓毒症患者早期T细胞抗原受体β链CDR3的组成及多态性

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目的 采用高通量测序的方法 探讨脓毒症患者早期T细胞抗原受体(TCR)β3链互补决定区3(CDR3)的组成及多态性.方法 从深圳市人民医院重症医学科收集脓毒症患者6例,从体检科收集年龄匹配的对照患者9例,入科后留取其静脉血,分离外周血单核细胞并提取DNA,对TCR β3链CDR3进行多重PCR扩增,然后对产物进行高通量测序及数据分析.结果 脓毒症组(S组)和对照组(N组)的TCR β链CDR3长度呈高斯分布,且两组前60种特有核苷酸序列和特有氨基酸表达水平存在很大差异;针对TRβV片段59个基因的表达水平进行比较,其中TRBV 10-2、TRBV 10-3、TRBV 12-1、TRBV 5-7的表达水平差异有统计学意义(P<0.05);对TRβJ片段中的14个基因的表达水平进行了F检验,其中TRBJ 1-1、TRBJ 1-2、TRBJ 2-1、TRBJ 2-5的表达水平差异有统计学意义(P<0.05).结论 脓毒症患者早期T细胞TCR β链CDR3的多态性发生了明显改变,提示其与脓毒症的免疫发病机制有关,这将为脓毒症的发病机制研究、治疗和预后的判断提供新的方法和手段.
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