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目的 分析不同剂量照射后成纤维细胞中玻连蛋白及胶原蛋白表达改变及其时间变化规律,初步探讨玻连蛋白作为放射性肺纤维化指标的意义.方法 采用137 Cs辐射源,对人胚肺成纤维细胞WI-38、IMR-90各照射0、4、6、8、10和12 Gy,并于照后6、12、24、36、48和60 h收集细胞及培养上清液,采用Western blot法检测玻连蛋白和胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ含量,采用实时PCR法及ELISA法分别检测玻连蛋白的转录水平及其细胞培养上清中的蛋白表达量.结果 Western blot结果显示,受照射后两种成纤维细胞玻连蛋白及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达呈正相关性(r=0.40～0.79,P＜0.05),都显著高于未经照射的对照组(t=3.04 ～25.45,P＜O.05),且蛋白表达的剂量效应和时间效应均呈现先增高后降低的变化趋势.玻连蛋白与胶原蛋白在8 ～10 Gy照后48 h,表达量最高(t=2.92～18.86,P＜0.05).Real-time PCR结果与ELISA结果显示,玻连蛋白mRNA表达及其在上清中含量受照射剂量影响较显著(F=27.09 ～ 42.62,P＜0.05),而受时间影响较小.结论 照射后成纤维细胞中玻连蛋白在细胞内、上清中及mRNA表达水平均可能作为照射后纤维化的指标.而8 Gy照射及照射后48 h是产生成纤维细胞放射性纤维化的较优实验条件。