目的:探讨中药复方DSQ-03 Beagle犬含药脑脊液对体外培养的皮层神经元凝血酶合并缺血缺氧损伤的保护作用,并探讨其作用的时间窗,为进一步开展临床研究提供依据。方法:(1)采用脑脊液药理学和原代神经细胞培养的方法,用Beagle犬的含DSQ-03脑脊液(CSF)体外培养SD大鼠脑皮层的神经细胞。(2)用凝血酶合并缺血缺氧损伤神经细胞,建立急性脑出血(AICH)的体外细胞模型(TIH)。(3)在TIH损伤后6,12,24,72 h,用MTT法检测神经细胞线粒体活力,并测定细胞外液LDH漏出率。结果:AICH后,神经细胞内线粒体活力、LDH漏出和神经细胞凋亡在0~72 h都有动态变化,Beagle犬含药脑脊液干预ICH的时间窗有:增加细胞活力在6 h内效果最好,0~72之内都有作用;减少LDH漏出方面,48~72 h的效果最好,0~72 h都有作用。结论:(1)凝血酶合并缺血缺氧损伤的体外培养神经细胞模型(TIH)是研究急性脑出血较好的细胞模型。它更加符合ICH后对神经细胞损伤的病理生理机制。(2)DSQ-03是一个神经细胞保护剂,可以增加细胞线粒体活力,抑制LDH漏出。(3)DSQ-03干预AICH的时间窗为0~72 h。