目的 通过离体和在体实验探讨低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)抗炎效应的影响.方法 离体实验采用全骨髓细胞贴壁法分离培养大鼠BMSC,经3次传代后,以1× 106个/ml密度接种于24孔培养板(1ml/孔),采用随机数字表法,将其分为5组(n=8):对照组(C组)、常氧培养组(N组)、低氧预处理组(H组)、低氧预处理+转录激活子3(STAT3)抑制剂Stattic组(HS组)和低氧预处理+抗IL-10单克隆抗体组(HA组).C组为DMEM培养液;N组在21％ O2-74％ N2-5.0％CO2常氧环境中培养48 h;H组在0.5％ O2-94.5％ N2-5.0％ CO2低氧环境中培养24h后再置入常氧环境中继续培养24 h;HS组和HA组于低氧预处理前分别加入500 μg/ml Stattic和100μg/mnl抗IL-10单克隆抗体.各组处理结束后采用Western blot法测定BMSC磷酸化STAT3(p-STAT3)和IL-10表达.在体实验 鞘内成功置管的健康雄性SD大鼠,采用阻断胸主动脉联合体循环低血压的方法制备脊髓缺血再灌注损伤模型.取脊髓缺血再灌注大鼠300只,体重300 ～ 350 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=60):C组于再灌注即刻鞘内注射DMEM培养液300μl;N组、H组、HS组、HA组于再灌注即刻分别鞘内注射离体实验中N组、H组、HS组和HA组处理的l× 106个/ml BMSC悬液300μl.于缺血前、再灌注4、12、24和48 h(T0-4)时进行后肢神经行为学评分,然后处死大鼠,取脊髓组织,采用ELISA法测定IL-10、NF-α、IL-1β、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)含量,免疫组织化学方法测定小胶质细胞的活化水平.结果 与C组和N组比较,H组BMSC p-STAT3和IL-10表达上调,T2.时后肢神经行为学评分和脊髓IL-10含量升高,脊髓TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1、MIP-1α含量和小胶质细胞活化水平降低(P＜0.05);与H组比较,HS组BMSC p-STAT3和IL-10、HA组BM-SC IL-10表达下调,2组T2.时后肢神经行为学评分和脊髓IL-10含量降低,脊髓TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1、MIP-1α含量和小胶质细胞活化水平升高(P＜0.05).结论 低氧预处理可增强大鼠BMSC的抗炎效应,从而提高BMSC减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤的效果。
低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞抗炎效应的影响:离体和在体实验
【摘 要】
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目的 通过离体和在体实验探讨低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)抗炎效应的影响.方法 离体实验采用全骨髓细胞贴壁法分离培养大鼠BMSC,经3次传代后,以1× 106个/ml密度接种于24孔培养板(1ml/孔),采用随机数字表法,将其分为5组(n=8):对照组(C组)、常氧培养组(N组)、低氧预处理组(H组)、低氧预处理+转录激活子3(STAT3)抑制剂Stattic组(HS组)和低氧预处理
【机 构】
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350025福州市,南京军区福州总医院麻醉科,350025福州市,南京军区福州总医院麻醉科,350025福州市,南京军区福州总医院麻醉科,武警八七一零部队医院麻醉科,350025福州市,南京军区福州总
【出 处】
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中华麻醉学杂志
【发表日期】
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2013年33期
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