探讨微小RNA(miRNA，miR)-362-5p对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡的影响及其调控机制。
方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人胃癌细胞株和正常胃黏膜细胞中miR-362-5p的表达；采用脂质体瞬时转染技术转染miR-362-5p抑制物；噻唑蓝(MTT)法检测miR-362-5p对胃癌细胞株SGC-7901增殖能力的影响；流式细胞术检测miR-362-5p对胃癌细胞周期和凋亡的影响；利用Targetscan信息学预测软件预测miR-362-5p靶向调控Cylindromatosis(CYLD)基因，构建携带CYLD野生型及突变型3’非翻译区(3’UTR)野生型和突变型荧光素酶报告载体，并利用双荧光素酶活性分析检测；Western blot检测miR-362-5p对CYLD蛋白表达的调控作用。
结果miR-362-5p在胃癌细胞株SGC-7901、AGS、MKN28的表达水平分别为6.27±0.70、4.63±0.35、5.53±0.45，明显高于胃黏膜细胞(P＝0.006、0.003、0.003)。转染miR-362-5p抑制物后，胃癌细胞SGC-7901中miR-362-5p表达水平下降[miR-362-5p-IN组(0.41±0.07)，miR-362-5p NC组(0.84±0.07)，P＝0.022]。下调miR-362-5p后显著抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖[48 h(吸光度值)：miR-362-5p-IN组：0.28±0.02，miR-362-5p NC组：0.45±0.04，P＝0.028；72 h(吸光度值)：miR-362-5p-IN组：0.33±0.02，miR-362-5p NC组：0.61±0.04，P＝0.003]；下调miR-362-5p后流式细胞术结果显示胃癌细胞G1/G0期比例增加[miR-362-5p-IN组：(78.04±3.74)%，miR-362-5p NC组：(67.86±3.35)%，P＝0.017]，凋亡增加[miR-362-5p-IN组：(33.29±4.86)%，miR-362-5p NC组：(18.20±0.80)%，P＝0.040]。双荧光素酶报告基因实验验证CYLD是miR-362-5p的潜在靶基因。Western blot法检测结果显示CYLD蛋白水平与miR-362-5p表达呈负相关。
结论miR-362-5p可通过靶向负调控CYLD蛋白，促进胃癌细胞的增殖，抑制细胞凋亡，进而促进胃癌的发生发展。