无线粒体DNA的人肺腺癌A549细胞系的构建

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lovedan_33

【摘要】

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目的:建立无线粒体DNA(mtDNA)的人肺腺癌ρ^0A549细胞系。方法:在含50ng/mL溴化乙锭(EB)、100μg/mL丙酮酸钠和50μg/mL尿嘧啶核苷的RPMI1640细胞培养基中传代培养A549细胞;

【作者】

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李素芬郝西琳王唯斯严长宝赵妤余敏熊伟

【机构】

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大理大学基础医学院,大理白族自治州第一人民医院病理科,云南大学生命科学学院

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

：

2019年1期

【关键词】

：

线粒体DNA 缺失肺腺癌 A549细胞系

【基金项目】

：

国家自然科学基金(81560458,31601155,31760331);云南省教育厅科学研究基金(2016ZDX01,2016ZDX05);云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目(2017HB077);大理大学大学生科研基金(KYSX2018032);大理大学第一批创新团队项目(ZKPY2019308)

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目的:建立无线粒体DNA(mtDNA)的人肺腺癌ρ^0A549细胞系。方法:在含50ng/mL溴化乙锭(EB)、100μg/mL丙酮酸钠和50μg/mL尿嘧啶核苷的RPMI1640细胞培养基中传代培养A549细胞;用低剂量EB连续诱导培养35d后,采用光镜观察、TaqMan探针法实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹鉴定无mtDNA的ρ^0A549细胞系;采用MTT法测定ρ^0A549细胞增殖曲线。结果:倒置显微镜下野生型ρ^+A549细胞为多角形,ρ^0A549细胞形态呈拉长枝状;qPCR结

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