【摘 要】
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目的 探讨GAD抗原肽抗体诱导特异性免疫耐受对IDDM糖尿病的基因治疗.方法构建Ig/MBAE、GAD-Ig/MBAE融合蛋白表达载体,制备产重组病毒的病毒包装细胞,经逆转录病毒载体介导基因转染B细胞,对非胖型糖尿病小鼠(NOD)进行基因治疗,以血糖指标和病理组织学分析评价疗效.结果1.酶切鉴定证实Ig/MBAE、GAD-Ig/MBAE表达载体构建正确.2.RT-PCR可检测到转染48h GAD-
【机 构】
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100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室,100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室,100850,北京,军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室,100850,北京,
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目的 探讨GAD抗原肽抗体诱导特异性免疫耐受对IDDM糖尿病的基因治疗.方法构建Ig/MBAE、GAD-Ig/MBAE融合蛋白表达载体,制备产重组病毒的病毒包装细胞,经逆转录病毒载体介导基因转染B细胞,对非胖型糖尿病小鼠(NOD)进行基因治疗,以血糖指标和病理组织学分析评价疗效.结果1.酶切鉴定证实Ig/MBAE、GAD-Ig/MBAE表达载体构建正确.2.RT-PCR可检测到转染48h GAD-Ig/B细胞中的GAD-Ig融合基因表达;Western blot和双夹心ELISA可检测到转染细胞胞浆和细胞上清中的GAD-Ig融合蛋白;3.在治疗第36周,GAD-Ig/B细胞治疗组的糖尿病发病率由B细胞和Ig/B细胞组的100%降低至55.5%,胰腺组织病理分析提示,GAD-Ig/B细胞治疗组的胰岛组织形态接近正常,胰岛组织中淋巴单核细胞的浸润得到有效控制.结论GAD抗原肽抗体通过逆转录病毒介导的基因治疗,可有效地延迟NOD小鼠的糖尿病发病及明显降低发病率。
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