IκBα缺失突变体真核表达载体的构建、表达及其生物活性检测

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong469

【摘要】

：

旨在构建缺失N端前36个氨基酸的IκBα突变体真核表达载体,并对其表达及生物学活性进行检测。从人源子宫颈癌细胞HeLa中提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得IκBα缺失突变体的cD

【作者】

：

黄思超杜军邱胜红徐俊傅刘鹏马锦珊蔡绍晖

【机构】

：

暨南大学药学院,中山大学药学院

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2009年11期

【关键词】

：

IΚBΑ 缺失突变体载体构建 NF-ΚB IκBα△ Deletion mutant Vector construction NF-κB

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30672510）,广东省科技计划重点资助项目（7112208000694）

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旨在构建缺失N端前36个氨基酸的IκBα突变体真核表达载体,并对其表达及生物学活性进行检测。从人源子宫颈癌细胞HeLa中提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得IκBα缺失突变体的cDNA,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1/myc-HisA中,构建重组载体pcDNA3.1-IκBαΔN。通过PCR方法、NcoⅠ酶切以及核酸测序分析对其进行鉴定;采用WesternBlot检测IκBα缺失突变体蛋白在HeLa细胞中的表达。将pcDNA3.1-IκBαΔN和pNF-κB-Luc共转染HeLa细胞,经TNF

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