缺氧对钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶表达的影响及其与p38 MAPK信号通路活化的关系

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ASHLEY920
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目的 探讨缺氧对钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(CASK)表达的影响及其与p38MAPK信号通路活化的关系.方法 采用定量PCR方法Western blot技术,检测内皮细胞株的CASK在常氧和缺氧1、3、6、12 h条件下表达情况.采用Western blot技术,检测常氧和缺氧1、3、612 h条件下p38 MAPK 180位苏氨酸/182位酪氨酸双位点磷酸化情况,及p38信号通路特异性阻断剂SB203580预处理1 h,血管内皮细胞缺氧3 h后CASK蛋白的表达.采用双荧光素酶报告系统,分析常氧和缺氧1、3、6、12 h条件下CASK启动子报告基因的活性.结果 缺氧能够明显上调CASK mRNA和蛋白的表达,缺氧3 h,CASK mRNA的表达为常氧对照组的1.8倍,CASK蛋白表达为常氧对照组的1.4倍.p38 MAPK信号通路阻断剂SB203580预处理,能够以剂量依赖性方式抑制3 h缺氧诱导的内皮细胞CASK蛋白表达.不同时间的缺氧能够明显增强CASK荧光素酶报告基因的活性.结论 缺氧能够诱导内皮细胞CASK的表达部分依赖于p38 MAPK信号的活化.
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