【摘 要】
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目的构建含有小鼠Cdc25B基因的真核表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法目的基因Cdc25B经化学合成后,定向克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院临床检验诊断学教研室,内蒙古医科大学附属医院检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81360109,81660267);内蒙古自然科学基金资助项目(2013MS1163)
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目的构建含有小鼠Cdc25B基因的真核表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法目的基因Cdc25B经化学合成后,定向克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体中,经过限制性内切酶KpnⅠ和ApaⅠ进行双酶切和测序鉴定,构建真核表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B,应用脂质体法转染HEK293细胞,通过Western blot检测细胞内Cdc25B的表达。结果pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B真核表达载体构建成功,将其转染HEK29
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