该研究旨在预测民族药黄秦艽防治非酒精性肝病作用的活性成分和作用靶点及信号通路，并通过细胞实验对活性成分和相关靶点进行初步验证，阐述黄秦艽保肝的作用机制。通过中药成分及中药药理数据库和分析平台检索，结合药动学参数中的口服利用度和类药性原则筛选黄秦艽候选活性成分，通过蛋白数据库预测候选活性成分靶点，并预测与非酒精性肝病相关的疾病靶点。利用Cytoscape软件构建“活性成分-靶点-疾病”网络，通过String数据库构建蛋白互作网络，推测核心靶点。通过DAVID生物信息注释数据库进行GO注释分析、KEGG通路分析以及富集分析。最后通过黄秦艽水提物（WVBF）干预H₂O₂诱导LO2肝细胞损伤模型实验进行核心靶点和通路的初步验证。通过MTT法和实时无标记法检测细胞活力，采用实时定量PCR法分析相关基因的表达量。首先，该文通过网络药理学从黄秦艽中获得14个活性成分，成分对应的潜在靶点共有287个，与非酒精肝病相关靶点有587个，有效成分靶点与疾病靶点交集后获得13个核心靶点。其次，GO富集分析显示，这些基因主要影响核受体的活性、转录因子的活性、类固醇激素受体活性、泛素样蛋白连接酶结合、蛋白质异二聚化活性、转录辅助因子的结合等26个生物过程。KEGG富集分析显示，PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路、胰岛素信号通路、TNF信号通路和一些癌症相关通路基因富集较多。最后，通过体外肝细胞实验成功验证TNF-α和MAPK8是其重要靶点，这提示黄秦艽对肝损伤有显著改善作用。TNF-α和MAPK8是其作用靶点之一。由上述结果得出，基于网络预测黄秦艽通过多成分-多靶点-多途径共同调控非酒精性肝病的物质基础和生物学机制，核心靶点通过细胞成功验证，这为民族药黄秦艽的深度开发提供数据基础和科学依据。