【摘 要】
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目的:验证及改良成骨细胞原代培养常用方法,探讨该方法的可行性和应用价值.方法:取材于出生2～3 d小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细
【机 构】
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新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科,兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科,新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,兰州军区乌鲁木齐总医院动物实
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目的:验证及改良成骨细胞原代培养常用方法,探讨该方法的可行性和应用价值.方法:取材于出生2～3 d小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代.细胞采用Gomori钙钴法染色并进行细胞形态观察,鉴定成骨细胞起源,根据细胞的生长曲线以及贴壁率观察细胞的生长情况.结果:原代培养48 h后,大量细胞贴壁生长,呈长梭形或有2～3个突起,胞质透亮、饱满,7 d后细胞铺满整个平皿底面.所得细胞经Gomori钙钴法鉴定,证实为成骨细胞.细胞接种后第1个24 h为细胞潜伏适应期,第2～7个24 h生长曲线基本为线性曲线,是细胞的对数生长期.细胞贴壁主要发生在接种10 h之内.结论:采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法.
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