重组腺病毒介导的gfp-bcl-XL对视网膜变性鼠光感受器细胞保护作用的研究

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目的

观察重组腺病毒rAd-gfp-bcl-XL治疗视网膜变性(retinal degeneration, RD)鼠的疗效。

方法

40只RD鼠随机分成A、B组,每组20只,右眼为治疗眼,左眼为对照眼。A、B组治疗眼分别于RD鼠生后10d及22d视网膜下腔注射含绿色荧光蛋白基因gfp和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒颗粒;术后15、30d摘除治疗眼和对照眼行冰冻切片、透射电镜下观察、石蜡切片、HE染色并提取视网膜总RNA;行逆转录聚合酶链反应分析bcl-XL基因的mRNA表达水平;免疫组化分析治疗眼和对照眼的Bcl-XL蛋白水平。

结果

治疗眼视网膜有较广泛的绿色荧光蛋白表达,说明重组腺病毒成功的将bcl-XL转染至视网膜光感受器细胞,且有bcl-XL表达;术后30d,A组鼠治疗眼和对照眼bcl-XL的mRNA表达水平及Bcl-XL蛋白含量有明显差异;透射电镜下可见治疗眼的内节段较对照眼完好;HE染色示治疗眼视网膜光感受器细胞层较对照眼厚。而B组鼠治疗眼和对照眼的视网膜光感受器细胞层的厚度无明显差异。

结论

注射至早期RD鼠视网膜下腔中的rAd-gfp-bcl-XL能有效转染光感受器细胞并发挥抗凋亡作用,但对晚期RD鼠的疗效不明显。

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