碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

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以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(<90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。
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