【摘 要】
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目的探讨内毒素耐受树突状细胞(endotoxin tolerant dendritic cell, ETDC)免疫功能的改变，观察其对脓毒症模型小鼠的作用。方法以脂多糖刺激小鼠来源骨髓树突状细胞制备ETDC,流式细胞仪检测ETDC表面标志物主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)Ⅱ、CD86和CD11c表达水平，细胞计数试剂盒检测T淋巴细胞
【机 构】
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目的探讨内毒素耐受树突状细胞(endotoxin tolerant dendritic cell, ETDC)免疫功能的改变，观察其对脓毒症模型小鼠的作用。
方法以脂多糖刺激小鼠来源骨髓树突状细胞制备ETDC,流式细胞仪检测ETDC表面标志物主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)Ⅱ、CD86和CD11c表达水平，细胞计数试剂盒检测T淋巴细胞增殖率，ELISA检测细胞上清液中细胞因子水平。将36只BALB/c小鼠分为4组，空白对照组不做任何处理，假手术组行单纯切开缝合术，脓毒症组和ETDC回输治疗组行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型前，分别尾静脉回输0.9%氯化钠溶液和ETDC与0.9%氯化钠混悬液。检测各组小鼠血丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspatate, AST)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factro, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-10水平和脾脏辅助性T-淋巴细胞(help T cells, Th)17/调节性T淋巴细胞(regulatory T cells, Treg)比例，观察小鼠肝脏、肾脏和回肠病理学表现。组间比较采用t检验或χ2检验。
结果ETDC表面MHCⅡ、CD86和CD11c表达分别为70.4%、43.1%、73.1%,较成熟树突状细胞(mature dendritic cell, mDC)的96.1%、89.5%和84.6%显著下降(χ2值分别为56.47、83.78和23.29,均P<0.01)。ETDC细胞上清液中IL-10、TNF-α和IL-6分别为(978.04±56.70)、(980.34±111.96)和(12 743.03±865.81) ng/L, mDC分别为(741.35±99.23)、(1 703.11±117.00)和(19 052.28±1 145.84) ng/L,差异均有统计学意义(t值分别为5.073、10.93和10.76,均P<0.01)。ETDC和T淋巴细胞1∶5、1∶10共培养的增殖率分别为(676.95±85.99)%和(514.00±106.39)%, mDC为(956.25±127.12)%和(772.07±214.08)%。ETDC回输治疗组小鼠肝脏、肾脏和回肠病理学改变明显轻于脓毒症组。ETDC回输治疗组小鼠血清ALT和AST为(299.71±36.91)和(690.39±154.92) U/L, TNF-α、IL-6和IL-10分别为(0.067±0.005)、(0.428±0.051)和(0.058±0.005) ng/L,脓毒症组ALT和AST为(620.67±69.27)和(1 430.17±134.05)U/L, TNF-α、IL-6和IL-10分别为(0.085±0.007)、(0.774±0.088)和(0.036±0.005)ng/L,差异均有统计学意义(t值分别为11.60、10.96、5.991、8.657和8.042,均P<0.01)。ETDC回输治疗组小鼠Treg/Th17比例为23.4%,脓毒症组为60.8%(χ2＝28.69, P<0.01)。
结论ETDC回输对脓毒症模型小鼠具有保护作用，可能是通过调节T淋巴细胞分化发挥了负向免疫调控作用。
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