人类疱疹病毒8型实时荧光定量PCR外标准品的构建

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yaomingjc

【摘要】

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目的构建人类疱疹病毒8型（HHV-8）基因质粒标准品，以便快速、灵敏、可靠地检测与HHV-8相关疾病患者的病毒载量。方法提取HHV-8基因组DNA，以HHV-8ORF26为目的基因设计引物，进行PCR扩

【作者】

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郭建石岩普雄明

【机构】

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石河子大学医学院,新疆维吾尔自治区人民医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2013年15期

【关键词】

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人类疱疹病毒人类疱疹病毒8型基因质粒标准品实时荧光定量PCR 卡波西肉瘤 human herpesvirus human herpesvirus 8 g

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（81260311）.

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目的构建人类疱疹病毒8型（HHV-8）基因质粒标准品，以便快速、灵敏、可靠地检测与HHV-8相关疾病患者的病毒载量。方法提取HHV-8基因组DNA，以HHV-8ORF26为目的基因设计引物，进行PCR扩增；纯化目的片段与pMD19-TVector连接并转化到大肠杆菌中；提取重组质粒DNA，并行PCR、测序鉴定，计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品，实时荧光定量PCR（Real-timeFQ-PCR）构建标准曲线。结果HHV-8ORF26目的片段制备成功，获得稳定的重组质粒，保证了目的片段的特异性

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