【摘 要】
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目的：研究Rab18是否通过Janus激酶2（JAK2）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路下调脂滴包被蛋白2（PLIN2）表达，并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法：采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育人THP-1巨噬细胞不同时间（0、6、12和24 h），用Western blot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平，
【机 构】
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南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81973326）；
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目的：研究Rab18是否通过Janus激酶2（JAK2）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路下调脂滴包被蛋白2（PLIN2）表达，并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法：采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育人THP-1巨噬细胞不同时间（0、6、12和24 h），用Western blot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平，使用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积的变化。制备野生型、活化型和失活型Rab18巨噬细胞，予以ox-LDL孵育，Western blot和RT-qPCR检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平，细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞内p-JAK2和p-STAT3的核转位情况。用JAK2抑制剂AG490预处理活化型Rab18细胞，再用ox-LDL孵育该细胞，Western blot和RT-qPCR检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平，细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞中PLIN2的表达，油红O染色和GPO-PAP酶法观察细胞内脂质蓄积情况及甘油三酯（TG）含量。结果：ox-LDL处理24 h后，Rab18、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及PLIN2蛋白水平显著升高（P<0.05），脂质蓄积增加。活化型和野生型Rab18上调JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平（P<0.05），下调PLIN2蛋白表达（P<0.05），细胞脂质蓄积及TG含量减少；免疫荧光显示Rab18与JAK2和STAT3存在共定位关系，活化型Rab18上调p-JAK2和p-STAT3水平，促进p-STAT3核移位；JAK2抑制剂AG490处理后，PLIN2表达及TG含量显著增加（P<0.05），细胞脂质蓄积增加。结论：Rab18通过JAK2/STAT3信号通路减少PLIN2表达，并抑制人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。
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