piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证

来源 :四川大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:mugua220
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piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PBll56、atula—pBac—K10.ITR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmCherry—N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一
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