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摘要 ：目的：观察水药骂广瓦水提物各萃取部位的镇痛抗炎作用， 并确定其镇痛抗炎作用的有效部位。方法： 通过醋酸诱发小鼠扭体及热板法致痛、二甲苯所致耳廓肿胀实验，观察其各萃取部位的镇痛抗炎作用。结果：水药骂广瓦水提物正丁醇组对醋酸诱发小鼠扭体的镇痛率为52.6%，与空白对照组比较差异有显著性 （P<0.01）；热板法致痛与空白对照组比较差异有显著性 （P<0.05，P<0.01）；二甲苯所致耳廓肿胀的抑制率为55.99%， 与空白对照组比较差异有显著性 （P<0.01）。结论：水药骂广瓦水提物正丁醇提取部位具有明显的镇痛抗炎作用，是水药骂广瓦发挥镇痛抗炎作用的主要有效部位。
关键词：水药骂广瓦； 镇痛抗炎； 有效部位
Abstract： Objective： To observe extraction site of Shui Medicine Ma Guang Wa s extracts the analgesic and anti-inflammatory effects， and to determine the active part of its analgesic and anti-inflammatory effect. Methods： Through acetic acid induced writhing and the pain caused by hot plate method，xylene induced ear edema observed analgesic anti-inflammatory effects of its extraction site。 Results：Shui Medicine Ma Guang Wa extract n-butanol group to acetic acid induced writhing analgesia was 52.6%， with the control group the difference was significant （P <0.01）；hot plate induced pain group with the blank control group the difference was significant （P <0.05， P <0.01）； xylene induced ear edema inhibition rate was 55.99%， with the control group， the difference was significant （P <0.01）. Conclusion：Shui Medicine Ma Guang Wa extract n-butanol extract fractions have significant analgesic anti-inflammatory effects，of which is Shui Medicine Ma Guang Wa main parts to play analgesic effect。
Keyword：Shui Medicine Ma Guang Wa；Analgesic anti-inflammatory；active site
基金项目：贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目（No.黔省专合字（2010）156号）
贵州省卫生厅-黔南民族医学高等专科学校科技联合基金项目（gzwkj2012-2-013）
贵州省黔南州科技计划项目（黔南科合社字（2010）15号）
贵州省都匀市科技计划项目（匀市科字（2010）27号）
水药骂广瓦为马兜铃科植物金耳环的干燥全草。主要分布在两广及贵州三都等地，具有散寒，止咳，平喘，止痛等功效。在贵州三都及都匀水族地区多用于治疗风寒痹痛、龋
齿痛、跌打损伤、止咳祛痰、毒蛇咬伤[1-2]。笔者通过实验研究，证实骂广瓦有较好的止咳祛痰[3]、镇痛抗炎作用[4]。在此基础上，本文继续以镇痛、抗炎为指标，探究各萃取物镇痛抗炎活性，明确骂广瓦镇痛抗炎有效部位，为骂广瓦药用提供依据。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 骂广瓦药材购自贵州三都水族自治县草药市场，经贵阳中医学院李江教授鉴定为马兜铃科（Aristolochiaceae）植物金耳环Asarum insigne Diels的干燥全草。取适量药材粉碎后加水浸润1h，然后分别加水10倍、8倍煎煮2次，第1次2h，第2次1.5h，抽滤，合并滤液，转移至5000ml 的分液漏斗中， 加石油醚 （ 1：1/2、1：1/4、1：1/4） 萃取三次至石油醚层无色，合并萃取液， 减压回收石油醚得浸膏 （ A） ；向分液漏斗中继续加入乙酸乙酯（ 1：1/2、1：1/4 、1：1/4） 萃取三次至乙酸乙酯层无色，合并萃取液减压回收乙酸乙酯得浸膏 （B） ； 向分液漏斗中继续加入水饱和的正丁醇 （ 1：1/2、1：1/4、1：1/4） 萃取三次至正丁醇层无色， 合并萃取液减压回收正丁醇得浸膏 （ C） ；剩余母液 （ D）。将 A、B、C、D置冰箱中备用。 阿司匹林（武汉远大制药集团有限公司，批号：101107），其它化学试剂均为分析纯。
1.2 动物 清洁级昆明种小鼠，18～22g，♀♂各半，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（黔）2002-0001。小鼠分性别饲养于空调室内，室温（22±2） ℃，湿度（70±5） %，喂标准颗粒饲料，自由饮水和摄食。
1.3 仪器 GJ-8402 型热板测痛仪（ 中国浙江医疗器械厂）；电子天平（ALB-224，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）。
1.4 研究方法
1.4.1镇痛作用
与空白对照组比较，**P<0.01，*P<0.05
3 讨论
中医认为风寒痹痛主要是风、寒、湿三气外邪侵袭经络，气血闭阻不畅，引起关节、肢体等处出现酸、痛、麻、重及屈伸不利等症状[6]。西医认为这种疼痛属于复杂性区域疼痛综合征（CRPS）的一种，部分原因是由血管舒张、肿胀和水肿形成慢性的长期局部炎症引起相关细胞因子的释放引起的局部反应[7]。 风寒痹痛是一类常见的难治性疾病，如何有效的缓解这种疼痛是目前攻克的一项难题。
本文研究以镇痛、抗炎为主要指标，探究水药骂广瓦镇痛抗炎的有效部位。通过实验证明，水药骂广瓦各萃取部位对醋酸诱发小鼠扭体及热板法致痛和二甲苯所致耳廓肿胀实验具有镇痛、抗炎作用。不同的溶剂萃取， 各萃取部位的镇痛、抗炎效果也不同， 其中以C组即正丁醇组镇痛、抗炎作用最强， 具有很好的应用前景。因此， 正丁醇部位是骂广瓦发挥镇痛抗炎作用的主要有效部位，其有效成分应从正丁醇组中进一步分离得出。本研究可为今后继续研究骂广瓦的镇痛抗炎活性成分奠定基础。
参考文献：
[1]罗献瑞.实用中草药彩色图谱集[M].南宁：广西科技出版社.1993.12：52
[2]司有奇，陆龙辉.中国水族医药宝典[M].贵阳：贵州民族出版社.2007.9：318
[3]夏亚兰，魏学军，林先燕，等.水药骂广瓦提取液对小鼠止咳祛痰作用的实验研究[J].重庆医学，2012，4，41（10）：966-967.
[4]夏亚兰等.水药骂广瓦镇痛抗炎作用的实验研究[J].重庆医学，2013，8，42（23）：2762-2764
[5]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M]3版.北京：人民卫生出版社，2002.1：882-887，911
[6]潘利，杨德才.中医治疗风寒湿痹的研究进展[J]湖北中医杂志，2004，26（12）：44-45
[7]杨辉，温成平.风湿痹痛的中医治法探讨[J]风湿病与关节炎，2013，2（1）：42-44
关键词：水药骂广瓦； 镇痛抗炎； 有效部位
Abstract： Objective： To observe extraction site of Shui Medicine Ma Guang Wa s extracts the analgesic and anti-inflammatory effects， and to determine the active part of its analgesic and anti-inflammatory effect. Methods： Through acetic acid induced writhing and the pain caused by hot plate method，xylene induced ear edema observed analgesic anti-inflammatory effects of its extraction site。 Results：Shui Medicine Ma Guang Wa extract n-butanol group to acetic acid induced writhing analgesia was 52.6%， with the control group the difference was significant （P <0.01）；hot plate induced pain group with the blank control group the difference was significant （P <0.05， P <0.01）； xylene induced ear edema inhibition rate was 55.99%， with the control group， the difference was significant （P <0.01）. Conclusion：Shui Medicine Ma Guang Wa extract n-butanol extract fractions have significant analgesic anti-inflammatory effects，of which is Shui Medicine Ma Guang Wa main parts to play analgesic effect。
Keyword：Shui Medicine Ma Guang Wa；Analgesic anti-inflammatory；active site
基金项目：贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目（No.黔省专合字（2010）156号）
贵州省卫生厅-黔南民族医学高等专科学校科技联合基金项目（gzwkj2012-2-013）
贵州省黔南州科技计划项目（黔南科合社字（2010）15号）
贵州省都匀市科技计划项目（匀市科字（2010）27号）
水药骂广瓦为马兜铃科植物金耳环的干燥全草。主要分布在两广及贵州三都等地，具有散寒，止咳，平喘，止痛等功效。在贵州三都及都匀水族地区多用于治疗风寒痹痛、龋
齿痛、跌打损伤、止咳祛痰、毒蛇咬伤[1-2]。笔者通过实验研究，证实骂广瓦有较好的止咳祛痰[3]、镇痛抗炎作用[4]。在此基础上，本文继续以镇痛、抗炎为指标，探究各萃取物镇痛抗炎活性，明确骂广瓦镇痛抗炎有效部位，为骂广瓦药用提供依据。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 骂广瓦药材购自贵州三都水族自治县草药市场，经贵阳中医学院李江教授鉴定为马兜铃科（Aristolochiaceae）植物金耳环Asarum insigne Diels的干燥全草。取适量药材粉碎后加水浸润1h，然后分别加水10倍、8倍煎煮2次，第1次2h，第2次1.5h，抽滤，合并滤液，转移至5000ml 的分液漏斗中， 加石油醚 （ 1：1/2、1：1/4、1：1/4） 萃取三次至石油醚层无色，合并萃取液， 减压回收石油醚得浸膏 （ A） ；向分液漏斗中继续加入乙酸乙酯（ 1：1/2、1：1/4 、1：1/4） 萃取三次至乙酸乙酯层无色，合并萃取液减压回收乙酸乙酯得浸膏 （B） ； 向分液漏斗中继续加入水饱和的正丁醇 （ 1：1/2、1：1/4、1：1/4） 萃取三次至正丁醇层无色， 合并萃取液减压回收正丁醇得浸膏 （ C） ；剩余母液 （ D）。将 A、B、C、D置冰箱中备用。 阿司匹林（武汉远大制药集团有限公司，批号：101107），其它化学试剂均为分析纯。
1.2 动物 清洁级昆明种小鼠，18～22g，♀♂各半，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（黔）2002-0001。小鼠分性别饲养于空调室内，室温（22±2） ℃，湿度（70±5） %，喂标准颗粒饲料，自由饮水和摄食。
1.3 仪器 GJ-8402 型热板测痛仪（ 中国浙江医疗器械厂）；电子天平（ALB-224，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）。
1.4 研究方法
1.4.1镇痛作用
与空白对照组比较，**P<0.01，*P<0.05
3 讨论
中医认为风寒痹痛主要是风、寒、湿三气外邪侵袭经络，气血闭阻不畅，引起关节、肢体等处出现酸、痛、麻、重及屈伸不利等症状[6]。西医认为这种疼痛属于复杂性区域疼痛综合征（CRPS）的一种，部分原因是由血管舒张、肿胀和水肿形成慢性的长期局部炎症引起相关细胞因子的释放引起的局部反应[7]。 风寒痹痛是一类常见的难治性疾病，如何有效的缓解这种疼痛是目前攻克的一项难题。
本文研究以镇痛、抗炎为主要指标，探究水药骂广瓦镇痛抗炎的有效部位。通过实验证明，水药骂广瓦各萃取部位对醋酸诱发小鼠扭体及热板法致痛和二甲苯所致耳廓肿胀实验具有镇痛、抗炎作用。不同的溶剂萃取， 各萃取部位的镇痛、抗炎效果也不同， 其中以C组即正丁醇组镇痛、抗炎作用最强， 具有很好的应用前景。因此， 正丁醇部位是骂广瓦发挥镇痛抗炎作用的主要有效部位，其有效成分应从正丁醇组中进一步分离得出。本研究可为今后继续研究骂广瓦的镇痛抗炎活性成分奠定基础。
参考文献：
[1]罗献瑞.实用中草药彩色图谱集[M].南宁：广西科技出版社.1993.12：52
[2]司有奇，陆龙辉.中国水族医药宝典[M].贵阳：贵州民族出版社.2007.9：318
[3]夏亚兰，魏学军，林先燕，等.水药骂广瓦提取液对小鼠止咳祛痰作用的实验研究[J].重庆医学，2012，4，41（10）：966-967.
[4]夏亚兰等.水药骂广瓦镇痛抗炎作用的实验研究[J].重庆医学，2013，8，42（23）：2762-2764
[5]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M]3版.北京：人民卫生出版社，2002.1：882-887，911
[6]潘利，杨德才.中医治疗风寒湿痹的研究进展[J]湖北中医杂志，2004，26（12）：44-45
[7]杨辉，温成平.风湿痹痛的中医治法探讨[J]风湿病与关节炎，2013，2（1）：42-44