【摘 要】
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目的 通过真核表达载体介导人乳头瘤病毒(HPV)16型E2基因在HpG2细胞中的表达,探讨E2蛋白的促凋亡作用是否为非HPV病毒依赖性.方法 利用pcDNA3.1V5 His构建HPV16型E2基因的真
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
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目的 通过真核表达载体介导人乳头瘤病毒(HPV)16型E2基因在HpG2细胞中的表达,探讨E2蛋白的促凋亡作用是否为非HPV病毒依赖性.方法 利用pcDNA3.1V5 His构建HPV16型E2基因的真核表达载体并转染HpG2细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western b1ot检测转染后E2基因mRNA和蛋白的变化,AnnexinV-FTTC/PI双染后利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡.结果 转染携带HPV16型E2质粒后,HpG2细胞可表达E2蛋白.流式细胞仪检测结果显示,转染后细胞凋亡率(21.25±5.05)%与转染空载体细胞(10.91±2.70)%和未转染细胞(7.35±0.79)%比较差异有统计学意义(P＜0.05).激光共聚焦显微镜结果显示,转染后细胞凋亡明显增多.结论 E2蛋白可以明显诱导HPV感染无关的HepG2细胞凋亡,其凋亡作用不依赖HPV病毒.
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