【摘 要】
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[目的]分析纳武利尤单抗联合来那度胺对EGFR敏感性突变肺癌细胞PD1/PD-L1信号通路表达及T细胞增殖的影响.[方法]常规复苏EGFR敏感性突变细胞株PC9、HCC827,野生型A549、H1299肺癌细胞,分离健康人群外周血的T细胞,建立共培养体系,采用酶联免疫吸附法检测PD-L1表达和T淋巴细胞增殖.[结果]来那度胺联合纳武利尤单抗处理EGFR突变肺癌细胞株PC9,HCC827Spd-L1蛋白表达水平显著低于单独使用来那度胺细胞[(0.83±0.02)比(0.46 ±0.05),(1.13±1.1
【机 构】
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海安市人民医院肿瘤科,江苏海安226600;海安人民医院中心实验室,江苏海安226600
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[目的]分析纳武利尤单抗联合来那度胺对EGFR敏感性突变肺癌细胞PD1/PD-L1信号通路表达及T细胞增殖的影响.[方法]常规复苏EGFR敏感性突变细胞株PC9、HCC827,野生型A549、H1299肺癌细胞,分离健康人群外周血的T细胞,建立共培养体系,采用酶联免疫吸附法检测PD-L1表达和T淋巴细胞增殖.[结果]来那度胺联合纳武利尤单抗处理EGFR突变肺癌细胞株PC9,HCC827Spd-L1蛋白表达水平显著低于单独使用来那度胺细胞[(0.83±0.02)比(0.46 ±0.05),(1.13±1.10)比(0.63±0.06)],差异有统计学意义(P＜0.05).来那度胺可显著促进PC9、HCC827等EGFR敏感型细胞株共培养体系中T细胞增殖[(0.531比1.912),(0.492比1.954)],且来那度胺联合纳武利尤单抗对PC9、HCC827等EGFR敏感型细胞株共培养体系中T细胞增殖的促进作用更强,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]联合应用来那度胺和纳武利尤单抗可协同下调EGFR敏感性突变肺癌细胞PD1/PDL1信号表达,增强T细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用.
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1.2.4构建AS与SF之间的调控网络rn根据RNA-seq数据提取剪切因子(Splicing Factor,SF)的表达量,分析AS与SF在HCC肿瘤样本中的相关性,构建调控网络.同时调控网络中SF在Cytoscape筛选前10位的关键SF,并通过在线网站GEPIA分析这些关键SF在HCC患者与正常样本中的表达差异及对预后影响.
细胞穿膜肽由于存在靶细胞摄取效率低等问题,使其在药物递送载体领域的应用受到限制.本研究用基因工程手段将穿膜肽M918与靶向HER2的单链抗体偶联,通过大肠杆菌表达系统和镍亲和层析表达并纯化了重组蛋白M918-scFv.利用微量热泳动技术检测重组蛋白M918-scFv与HER2抗原的亲和能力;利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测重组蛋白的内吞效率.实验结果表明亲和层析获得的重组蛋白M918-scFv纯度较高,偶联M918,不会改变scFv与抗原的亲和能力.在HER2阳性细胞中,重组蛋白M918-scFv的内
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