【摘 要】
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目的建立起适合阳春砂的ISSR-PCR反应体系。方法综合运用单因素实验和L9(34)正交实验两种方法,对DNA模板、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶等因素进行优化,以及采用温度梯度筛选引物
【机 构】
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广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心
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目的建立起适合阳春砂的ISSR-PCR反应体系。方法综合运用单因素实验和L9(34)正交实验两种方法,对DNA模板、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶等因素进行优化,以及采用温度梯度筛选引物的退火温度。结果最终获得的阳春砂的最优ISSR-PCR体系为:总体积为20μl,其中包括10×ExTaqBuffer(含15mmol·L-1Mg2+)2μl,25ngDNA模板,0.50μmol·L-1引物,0.75mmol·L-1dNTPs和1.0UExTaq酶。通过温度梯度
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