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【摘要】目的：通过观察康复新液作用于实验大鼠后口腔溃疡的变化及检测外周血血清 IL-6 水平，评价其治疗效果并探讨其作用机制。方法 免疫法制备复发性口腔溃疡大鼠模型，随机分为正常组、溃疡组、康复新组、左旋咪唑组，Elisa 法检测血清 IL-6 的含量。结果 IL-6 水平溃疡组较正常组明显升高（P ＜ 0.01），康复新组与左旋咪唑组下降，接近正常组（P ＜ 0.01）。结论 康复新可能通过下调 IL-6 含量促进口腔溃疡愈合，减少溃疡复发。
关键词：康复新；大鼠；口腔溃疡
Effect of Kangfuxin Solution on the expression of IL-6 in rat oral ulcer
【Abstract】Objective：According to results the serum IL-6 level in peripheral blood changes of oral ulcer and detection of experimental rats，evaluate the curative effect and to explore its mechanism of action. Methods: Immune preparation model of the recurrent oral ulcer in rats, Were randomly divided into normal control group, ulcer group, Kangfuxin group, levamisole group, content determination of serum IL-6 by Elisa. Results: the level of IL-6 in gastric ulcer group significantly higher than that in normal group (P < 0.01), rehabilitation group and levamisole group decreased, close to the normal group (P < 0.01).Conclusion: Kangfuxin can reduce IL-6 content in promoting oral ulcer healing, reduce ulcer recurrence.
Key words: Kangfuxin; Rat; ROU
复发性口腔溃疡（recurrent oral ulceration，ROU）是最常见的口腔黏膜病，其患病率高达20%左右。具有明显的灼痛感，呈周期性复发且具有自限性，为孤立的、圆形或椭圆性的浅表性溃疡[1]。近年来多数学者认为该病与免疫（特别是自身免疫）有关，而利用免疫的方法制备的ROU大鼠模型与人类ROU基本相似[2]，所以可以用来研究人类的ROU。本研究通过观察康复新液治疗前后大鼠口腔溃疡及IL-6水平的变化来探讨复发性口腔溃疡可能的发生机制，为临床治疗提供一定的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物
清洁级Sprague-Dawley（SD）大鼠80只，体质量180~200g，雌雄各半。
1.1.2 药品及试剂
完全费氏佐剂，0.1mol/LPH7.4的PBS缓冲液，康复新液，左旋咪唑，IL-6酶联免疫试剂盒（R＆D公司，进口分装）。
1.2 免疫法制备ROU口腔溃疡大鼠模型
20只SD大鼠拉颈处死，取口腔黏膜组织，加入0.1mol/L，pH 7.4的PBS缓冲液，组织匀浆器匀浆制备组织匀浆，-70℃冰箱保存，注射时加入等量的完全费氏佐剂形成抗原乳化液。60只SD大鼠脊柱两侧分别注射0.1mL的抗原乳化液，每侧注射两点，每隔2周注射一次，共注射5次。溃疡发生后切取大鼠口腔溃疡组织，HE染色病理检查。
1.3 分组
将上述60只SD大鼠随机分为三组，溃疡组，康复新组及左旋咪唑组，另20只SD大鼠作为正常对照组，第三次注射抗原乳化液后局部涂敷康复新液，左旋咪唑20mg/kg剂量分别灌胃，1次/d，连续20d。观察大鼠口腔溃疡变化并眼眶采血，离心取上清，IL-6酶联免疫试剂盒检测。
1.4 统计学分析
采用SPSS17.0进行统计学分析，数据用χ±s表示，组间比较用两独立样本t检验，取α=0.05为显著性检验标准。
2 结 果
2.1病理变化
HE染色光镜观察：溃疡组织上皮内淋巴细胞浸润，溶解破溃，固有层内炎性细胞大量浸润，毛细血管充血扩张，腺体增生。
2.2 症状变化
大鼠在第3次注射抗原前均出现口腔溃疡。多发生在上下唇，圆形或椭圆形，边缘较整齐，黄白色伪膜覆盖。直径约2mm~5mm，3~5d愈合，后又复发。
2.3 血清IL-6的含量
见表1。
组别
n
IL-6
正常组
对照组
20
20
46.128±4.251
566.287±28.064△
模型组
20
47.564±4.452◇●
治疗组
20
53.025±2.065□
注: 模型组与正常组相比△、治疗组与模型组相比◇、对照组与模型组相比□、治疗组与对照组相比●：P＜0.01
3 讨 论
复发性口腔溃疡是口腔黏膜病中常见的黏膜疾病，发病率高，病复发性口腔溃疡是口腔黏膜病中常见的黏膜疾病，发病率高，病因复杂，有证据显示口腔溃疡的发生与免疫、遗传、系统性疾病及神经精神因素有关，其中与免疫因素密切相关表现为不能下调免疫激活的促炎细胞因子，如TNF-α、IL-6等[1]。IL-6由单核巨噬细胞分泌，是免疫应答及炎性反应的关键成分。主要是对中性粒细胞和巨噬细胞产生趋化作用，刺激巨噬细胞或单核细胞、淋巴细胞、细胞因子等炎性介质，可能参与白细胞的聚集和激活而造成黏膜损害。
引起实验大鼠发生口腔溃疡的机制，可能是同种异体口腔黏膜作为抗原进入机体后，产生特异性抗体而引发的口腔黏膜免疫反应的结果，其口腔病损与人类ROU相比，临床及实验室检查是相同的，所以可以作为人类ROU的动物模型为进一步研究人类ROU的病因和治疗提供基本手段和实验依据[2]。
康复新液其主要成分为多元醇类及肽类活性物质,具有促进新生肉芽组织生长,促进血管新生,改善创面微循环,抗炎消除水肿的功效[3]。本研究显示康复新液能有效改善创面的微循环,增强溃疡组织的抗炎和修复能力,并且还具有激活免疫系统,使细胞免疫功能增强,从而起到调节机体免疫功能的作用，且不良反应小，康复新液用于治疗消化道溃疡、宫颈糜烂、褥疮等均取得了较好的效果。康复新液既有缩短溃疡发作期的作用又可减轻疼痛,使用方便,可作为治疗口腔溃疡的首选药物。临床观察用于治疗RAU，亦取得满意疗效。
参考文献：
[1]周海文,吴岚,周曾同.复发性阿弗他溃疡的诊断与治疗〔J〕.中华口腔医学杂志,2007,42(1):57-59
[2]Rivera-Hidalgo F,Shulman JD,Beaeh MM.The association of tobacco and othe r factors with recurrent aPhthous stomatitis in an US adult population. OralDis,2004,10(6):335-345
[3] 杨新蕾,张新合.康复新液治疗II度烧伤疗效观察[J].中华中西医学杂志,2004,2(1):49 -50.
关键词：康复新；大鼠；口腔溃疡
Effect of Kangfuxin Solution on the expression of IL-6 in rat oral ulcer
【Abstract】Objective：According to results the serum IL-6 level in peripheral blood changes of oral ulcer and detection of experimental rats，evaluate the curative effect and to explore its mechanism of action. Methods: Immune preparation model of the recurrent oral ulcer in rats, Were randomly divided into normal control group, ulcer group, Kangfuxin group, levamisole group, content determination of serum IL-6 by Elisa. Results: the level of IL-6 in gastric ulcer group significantly higher than that in normal group (P < 0.01), rehabilitation group and levamisole group decreased, close to the normal group (P < 0.01).Conclusion: Kangfuxin can reduce IL-6 content in promoting oral ulcer healing, reduce ulcer recurrence.
Key words: Kangfuxin; Rat; ROU
复发性口腔溃疡（recurrent oral ulceration，ROU）是最常见的口腔黏膜病，其患病率高达20%左右。具有明显的灼痛感，呈周期性复发且具有自限性，为孤立的、圆形或椭圆性的浅表性溃疡[1]。近年来多数学者认为该病与免疫（特别是自身免疫）有关，而利用免疫的方法制备的ROU大鼠模型与人类ROU基本相似[2]，所以可以用来研究人类的ROU。本研究通过观察康复新液治疗前后大鼠口腔溃疡及IL-6水平的变化来探讨复发性口腔溃疡可能的发生机制，为临床治疗提供一定的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物
清洁级Sprague-Dawley（SD）大鼠80只，体质量180~200g，雌雄各半。
1.1.2 药品及试剂
完全费氏佐剂，0.1mol/LPH7.4的PBS缓冲液，康复新液，左旋咪唑，IL-6酶联免疫试剂盒（R＆D公司，进口分装）。
1.2 免疫法制备ROU口腔溃疡大鼠模型
20只SD大鼠拉颈处死，取口腔黏膜组织，加入0.1mol/L，pH 7.4的PBS缓冲液，组织匀浆器匀浆制备组织匀浆，-70℃冰箱保存，注射时加入等量的完全费氏佐剂形成抗原乳化液。60只SD大鼠脊柱两侧分别注射0.1mL的抗原乳化液，每侧注射两点，每隔2周注射一次，共注射5次。溃疡发生后切取大鼠口腔溃疡组织，HE染色病理检查。
1.3 分组
将上述60只SD大鼠随机分为三组，溃疡组，康复新组及左旋咪唑组，另20只SD大鼠作为正常对照组，第三次注射抗原乳化液后局部涂敷康复新液，左旋咪唑20mg/kg剂量分别灌胃，1次/d，连续20d。观察大鼠口腔溃疡变化并眼眶采血，离心取上清，IL-6酶联免疫试剂盒检测。
1.4 统计学分析
采用SPSS17.0进行统计学分析，数据用χ±s表示，组间比较用两独立样本t检验，取α=0.05为显著性检验标准。
2 结 果
2.1病理变化
HE染色光镜观察：溃疡组织上皮内淋巴细胞浸润，溶解破溃，固有层内炎性细胞大量浸润，毛细血管充血扩张，腺体增生。
2.2 症状变化
大鼠在第3次注射抗原前均出现口腔溃疡。多发生在上下唇，圆形或椭圆形，边缘较整齐，黄白色伪膜覆盖。直径约2mm~5mm，3~5d愈合，后又复发。
2.3 血清IL-6的含量
见表1。
组别
n
IL-6
正常组
对照组
20
20
46.128±4.251
566.287±28.064△
模型组
20
47.564±4.452◇●
治疗组
20
53.025±2.065□
注: 模型组与正常组相比△、治疗组与模型组相比◇、对照组与模型组相比□、治疗组与对照组相比●：P＜0.01
3 讨 论
复发性口腔溃疡是口腔黏膜病中常见的黏膜疾病，发病率高，病复发性口腔溃疡是口腔黏膜病中常见的黏膜疾病，发病率高，病因复杂，有证据显示口腔溃疡的发生与免疫、遗传、系统性疾病及神经精神因素有关，其中与免疫因素密切相关表现为不能下调免疫激活的促炎细胞因子，如TNF-α、IL-6等[1]。IL-6由单核巨噬细胞分泌，是免疫应答及炎性反应的关键成分。主要是对中性粒细胞和巨噬细胞产生趋化作用，刺激巨噬细胞或单核细胞、淋巴细胞、细胞因子等炎性介质，可能参与白细胞的聚集和激活而造成黏膜损害。
引起实验大鼠发生口腔溃疡的机制，可能是同种异体口腔黏膜作为抗原进入机体后，产生特异性抗体而引发的口腔黏膜免疫反应的结果，其口腔病损与人类ROU相比，临床及实验室检查是相同的，所以可以作为人类ROU的动物模型为进一步研究人类ROU的病因和治疗提供基本手段和实验依据[2]。
康复新液其主要成分为多元醇类及肽类活性物质,具有促进新生肉芽组织生长,促进血管新生,改善创面微循环,抗炎消除水肿的功效[3]。本研究显示康复新液能有效改善创面的微循环,增强溃疡组织的抗炎和修复能力,并且还具有激活免疫系统,使细胞免疫功能增强,从而起到调节机体免疫功能的作用，且不良反应小，康复新液用于治疗消化道溃疡、宫颈糜烂、褥疮等均取得了较好的效果。康复新液既有缩短溃疡发作期的作用又可减轻疼痛,使用方便,可作为治疗口腔溃疡的首选药物。临床观察用于治疗RAU，亦取得满意疗效。
参考文献：
[1]周海文,吴岚,周曾同.复发性阿弗他溃疡的诊断与治疗〔J〕.中华口腔医学杂志,2007,42(1):57-59
[2]Rivera-Hidalgo F,Shulman JD,Beaeh MM.The association of tobacco and othe r factors with recurrent aPhthous stomatitis in an US adult population. OralDis,2004,10(6):335-345
[3] 杨新蕾,张新合.康复新液治疗II度烧伤疗效观察[J].中华中西医学杂志,2004,2(1):49 -50.