【摘 要】
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目的:探讨在RNAi技术条件下,HSV-1感染Vero细胞过程中,病毒间层蛋白VP16的生物学功能.方法:用T7RNA聚合酶体外合成针对VP16 mRNA的3种T7 siRNAs.用Lipofectamine 2000脂质体
【机 构】
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中国协和医科大学/中国医学科学院医学生物学研究所,云南,昆明,650118
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目的:探讨在RNAi技术条件下,HSV-1感染Vero细胞过程中,病毒间层蛋白VP16的生物学功能.方法:用T7RNA聚合酶体外合成针对VP16 mRNA的3种T7 siRNAs.用Lipofectamine 2000脂质体转染Vero细胞后接种HSV-1,感染后12、24、36、48、60和72h,分别收取实验组和对照组标本,Karber法计算病毒滴度值,绘制子代病毒一步生长曲线.结果:病毒子代一步生长曲线显示,转染siRNAs的实验组Vero细胞接种HSV-1后24h(24h pi),病毒滴度明显低于对照组;12h pi也观察到病毒滴度低于对照组的现象;siRNAs具有协同作用,三种siRNAs同时作用时干扰效果最为明显;实验组病毒滴度高峰出现时间后移12h左右.结论:HSV-1间层蛋白VP16对病毒复制、成熟起重要的生物学作用.
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