【摘 要】
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旨在探究Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(type Ⅲ domain-containing protein5,FNDC5)对C3H10T1/2细胞成脂分化的调控作用.利用qRT-PCR和Western印迹检测FNDC5在C3H10T1/2细胞成
【机 构】
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山西农业大学动物科学学院动物遗传育种与繁殖系实验室,山西太谷030801
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旨在探究Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(type Ⅲ domain-containing protein5,FNDC5)对C3H10T1/2细胞成脂分化的调控作用.利用qRT-PCR和Western印迹检测FNDC5在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中的时序性表达规律;构建慢病毒包被的过表达/干扰FNDC5载体,转染C3H10T1/2细胞,采用qRT-PCR检测成脂分化关键基因的表达情况,油红O染色检测脂滴含量,利用Western印迹检测细胞外信号调节激酶(extracellularregulatedkinase 1/2,ERK1/2)及磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)的表达水平.C3H10T1/2细胞成脂诱导分化8d,Fndc5的表达量明显升高(P＜0.05);C3H10T1/2细胞中过表达FNDC5,成脂分化关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)和CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding protein alpha,C/EBPα)的表达量显著降低(P＜0.01),CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding protein beta,C/EBPβ)表达量明显降低(P＜0.05),脂滴含量明显减少,P-ERK1/2的含量明显降低(P＜0.05).C3H10T1/2细胞中干扰FNDC5,成脂分化关键基因PPARγ、 C/EBPβ、FABP4和C/EBPα的表达量显著升高(P＜0.01),脂滴含量明显增加,P-ERK1/2的含量明显升高(P＜0.05).本研究发现,FNDC5可以通过抑制ERK1/2的磷酸化水平,抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化,为FNDC5调控脂肪沉积的机制研究提供参考数据.
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