解淀粉芽孢杆菌产纤溶酶的19L发酵罐实验及其酶学性质

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在摇瓶实验的基础上,对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GZJSI-12-7产纤溶酶最佳条件进行19 L发酵罐实验,结果表明:GZJSI-12-7在发酵罐中培养6 h时开始产纤溶酶,78 h后纤溶酶产量基本稳定,达到4 178.39 IU/mL,产酶高峰比摇瓶发酵提前12 h左右。将发酵液经离心除菌、硫酸铵分级盐析、透析除盐、Sephadex G-75凝胶过滤,得到纤溶酶的纯化倍数为9.84倍,酶活力回收率为42.52%,比活力为48 073.193 IU/mg。对纤溶酶的酶学性质研究表明,该酶的分子质量约为30.2 kD,最适温度和pH值分别为40℃、7.5;在40℃以下酶的稳定性良好,超过50℃后酶活力迅速降低,耐热性较差;金属离子Mg2+、Ca2+、Mn2+对纤溶酶活性均有较强的激活作用,而Cu2+和Fe3+对酶活性具有明显的抑制作用。
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